[发明专利]一种剑叶龙血树总黄酮的质量检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药的检测方法，具体讲，涉及一种剑叶龙血树总黄酮的质量检测方法。

背景技术

剑叶龙血树收载于《广西壮族自治区壮药质量标准》第一卷，壮药名为榧勒垄，具有活血散瘀、定痛止血、敛疮生肌等功效，用于跌打损伤、淤血作痛、妇女气血凝滞、外伤出血和脓疮久不收口。常用作提取龙血竭的原料，本发明人从中提取精制得到有效部位—剑叶龙血树总黄酮，用于治疗冠心病心绞痛。现代研究表明其中主要含有黄酮类、二苯乙烯类、甾醇类、皂苷类等化合物，具有抗菌、抗炎、抗氧化活性，镇痛、止血、活血化瘀等多种药理作用。目前，针对原药材剑叶龙血树及提取物的质量控制标准研究，大多集中在测定其中二氢查耳酮类的代表性成分龙血素A、龙血素B，而对其他类别的主要活性成分，如黄烷类、二苯乙烯类的主要成分高纯度化学对照品纯化制备和含量测定研究，尚未见报道。

为此，特提出本发明。

发明内容

本发明的首要发明目的在于提出了一种剑叶龙血树的质量检测方法。

为了实现本发明的目的，采用的技术方案为：

本发明涉及一种剑叶龙血树的质量检测方法，所述检测方法包括采用变换波长HPLC法检测剑叶龙提取物——剑叶龙血素总黄酮中7-羟基-4'-甲氧基黄烷和/或紫檀茋的含量的步骤。

本发明的第一优选技术方案为：所述剑叶龙血树总黄酮中含7-羟基-4'-甲氧基黄烷不少于0.05wt%，和/或含紫檀茋不少于0.10wt%。

本发明的第二优选技术方案为：所述剑叶龙血树总黄酮中含7-羟基-4'-甲氧基黄烷不少于0.10wt%，和/或含紫檀茋不少于0.20wt%。

本发明的第三优选技术方案为：剑叶龙血树的检测方法包括以下步骤：

（1）取剑叶龙血树总黄酮加有机溶剂提取，回流提取0.5～2小时；

（2）选用色谱柱，色谱柱填料为以硅胶为载体的ODS柱，规格为4.6×150mm，粒径5μm；流动相：乙腈-0.2%磷酸溶液（36:64）；柱温：35℃；流速：1.0ml·min^-1，7-羟基-4'-甲氧基黄烷的保留时间为35.8min，紫檀茋的保留时间为41.7min，通过变换波长法，测定7-羟基-4'-甲氧基黄烷的检测波长为：280nm，测定紫檀茋的检测波长为:306nm。

本发明的第四优选技术方案为：步骤（1）中的有机溶剂选自丙酮、氯仿、乙酸乙酯或甲醇，优选为氯仿。

本发明的第五优选技术方案为：步骤（1）中的回流时间为1小时。

本发明的第六优选技术方案为：剑叶龙血树总黄酮的制备方法为：

（1）取剑叶龙血树，粉碎成粗粉；

（2）加含O.2‰～0.7‰氢氧化钠的25～75％乙醇回流提取二次，每次加4～14倍量，每次O.5～2小时，滤过，滤液合并；

（3）回收步骤（2）中的溶剂后加5～20％的盐酸调节pH值为1～3，放置6～18小时，滤过；

（4）沉淀加水洗涤至中性，干燥，加醋酸乙酯回流提取二次，每次加3～12倍量，每次0．5～2小时，滤过，滤液合并，

（5）回收步骤（4）中有机溶剂，提取液减压浓缩至相对密度在80℃下为1.1～l.6的稠膏，85℃以下干燥，粉碎，过筛，得到剑叶龙血树总黄酮。

下面对本发明的技术方案做进一步的解释和说明。

鉴于7-羟基-4'-甲氧基黄烷和紫檀茋二者已知的显著活性，采用7-羟基-4'-甲氧基黄烷和紫檀茋两类低极性成分，作为对剑叶龙血树的龙血树检测指标，从而全面评价其质量是十分必要的。本发明通过系统的质量控制方法学研究，采用变换波长法，建立了HPLC法同步测定这两个不同类别代表性成分的含量测定方法，为全面评价原药材剑叶龙血树及相关提取物质量提供参考。

本发明所提供的方法具有如下优点：

本发明通过色谱条件优化，应用变换波长检测HPLC法同步测定其中两个低极性不同类别药效成分，实现了一条快速经济，重现性好的质量检测方法，对实现药材及提取物全面质量控制有重要意义。

附图说明：

图1：254nm检视三个不同体系下7-羟基-4'-甲氧基黄烷TLC纯度检验；

图2：可见光下检视经10%H₂SO₄乙醇溶液显色后照片；

图3：7-羟基-4'-甲氧基黄烷纯度检验的紫外吸收光谱图；

图4：7-羟基-4'-甲氧基黄烷纯度检验的高效液相色谱图；