[发明专利]一种由鱼蛋白肽与大豆肽组成的蛋白肽的生产方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种蛋白肽的生产方法，具体涉及一种由鱼蛋白肽与大豆肽组成的蛋白肽的生产方法，属于微生物学、酶学中的蛋白质分子改造技术领域。

背景技术

蛋白质酶解后的产物小肽不但容易消化、吸收，而且还具有抗高血压、抗胆固醇、抗血栓形成、改善脂质代谢、增强人体体能、帮助恢复疲劳、促进钙磷和其它微量元素的吸收、促进大脑发育、提高记忆力、增强巨噬细胞和B细胞活力、增强免疫功能、保护表皮细胞、防止黑色素沉淀、消除体内自由基等功效。目前已开发的肽类食品产品有大豆肽、酪蛋白肽、玉米蛋白肽、水产蛋白肽等。

由于肽类食品的功能及良好的应用前景，国内外对各类肽类食品的生产方法进行大量的研究。目前肽类食品的生产方法主要有液体发酵、液体酶解法以及固态发酵与液体酶解相结合的生产方法。

液体发酵法是将蛋白质原料（豆粕、鱼肉等）加水混合，高温蒸汽灭菌后接入产蛋白酶的微生物进行发酵，发酵一定时间后，经过分离、浓缩、干燥，制成肽类食品。专利CN102028091A“一种纳豆菌发酵法制备低分子鱼肽的方法”公开了一种液体发酵法制备鱼蛋白肽的方法，它是以将鱼肉绞碎，加入水，添加麦芽糖或葡萄糖或乳糖或蔗糖，获得混合物；调节混合物的pH值，高温灭菌；冷却后接入纳豆菌种子液发酵；发酵液经离心、过滤，浓缩、干燥、粉碎获得低分子鱼肽产品。《液体发酵法发酵豆粕制备大豆肽的研究》（山东轻工业学院2009年硕士论文,管风波）提供了一种液体发酵法制备大豆肽的方法，它以豆粕为原料，加水灭菌后接入枯草芽孢杆菌、米曲霉或黑曲霉进行发酵而制备大豆肽。然而液体发酵法存在着生产效率低，产品质量不稳定方面等方面的问题。首先，液体发酵法由于供氧能力的限制，蛋白质原料的浓度都比较低，如液体发酵法制备大豆肽中，豆粕的浓度仅仅为2%～6%。蛋白质原料浓度低不但使得其生产效率低下，而且还会增加蒸发浓缩的成本。其次，液体发酵法发酵先产菌，再产酶，然后酶解蛋白原料得到蛋白肽。由于对产生的酶量及酶解条件不能精确控制，相对应地对蛋白质水解度不能精确控制，因此产品定质量的稳定难以保障。另外，如果采用纳豆芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌这些产蛋白酶的细菌进行发酵法制备蛋白肽，则会产生苦味肽，因而需要增加去除苦味的程序，增加了成本。

液体酶解法是将蛋白质原料与水混合，然后直接加入一种或多种复合蛋白酶进行保温酶解。加入的蛋白酶有胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶等。水解完成后，再依次通过加热灭酶、分离、浓缩和干燥，最后得到蛋白肽类产品。液体酶解法与液体发酵法相比，由于酶解体系中蛋白质原料浓度的增加，生产效率得到了大大提高。其次，液体酶解法能够对酶的量和酶解条件进行精确控制，产品质量比较稳定。液体酶解法存在的主要问题是外加大量的蛋白酶，生产成本高。另外蛋白酶酶解过程中也会产生苦味肽，因而需要增加去除苦味的程序，增加了成本。

专利CN100392092C“大豆肽生产方法”公开了一种固态发酵与液体酶解相结合的生产大豆肽的方法。它是以豆粕为原料，先接入枯草芽孢杆菌进行固态发酵，然后将经过发酵的固体培养物与水按混合，加入蛋白酶保温酶解，酶解后产物经过灭酶、过滤、脱苦脱色、精炼、杀菌制成成品而得到大豆肽产品。与液体发酵法相比，固态发酵与液体酶解相结合的方法生产效率大大提高，且产品质量比较稳定。与液体酶解法相比，固态发酵与液体酶解相结合的方法减少了外加酶的用量，降低了生产成本。然而专利CN100392092C公开的固态发酵与液体酶解相结合的方法存在的问题是酶解后会产生苦味肽，需要增加去除苦味的程序，增加了成本。

本发明对现有的固态发酵与液体酶解相结合的生产蛋白肽的方法进行了改进，选择了米曲霉、毛霉和黑曲霉作为固态发酵的菌种，而不是枯草芽孢杆菌。这些霉菌在发酵过程中除了可以产生蛋白酶外，还可以产生氨肽酶或羧肽酶，它们可从氨端或羧基端切除苦味肽上的疏水氨基酸，从而达到脱苦的目的。

发明内容

本发明的目的是针对目前蛋白肽生产方法存在的不足，提供一种由鱼蛋白肽与大豆肽组成的蛋白肽的生产方法，不但可以减少蛋白酶用量，而且不用去除酶解产物的苦味。

为了解决上述问题，本发明所采用的技术方案是：

一种由鱼蛋白肽与大豆肽组成的蛋白肽的生产方法，包括以下步骤：

（1）固体发酵：准备发酵原料，然后将其灭菌，冷却后接入发酵菌种，发酵温度控制在28℃～30℃，发酵时间为24h～48h；

（2）液体酶解：将经过发酵的固体培养物与水按1:5～1:8的质量比混合，加入蛋白酶，保温酶解；