[发明专利]一种高纯度卵磷脂的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于天然产物的分离提取技术领域，具体讲是属于一种高纯度卵磷脂的制备方法。

背景技术

卵磷脂，又称磷脂酰胆碱，是含磷的极性脂质之一，由法国人Gobley于1846～1847年从蛋黄和脑中首先发现，由Levenzai于1925年从其他磷脂中分离出来。

研究表明，卵磷脂具有乳化、增溶、润湿、抗氧化、发泡、晶化控制、与蛋白结合以及防止淀粉老化等多种理化功能。此外，卵磷脂也是生物膜的构成成分，是神经递质—乙酰胆碱的主要来源，可以修复线粒体，参与机体代谢。同时，卵磷脂还可促使胆固醇和蛋白质分子之间的结合，减轻血管壁类脂质的浸润，抑制动脉粥样硬化的产生和改善动脉壁的组织结。纯度高达98％以上的高纯度卵磷脂更是载药脂质体/脂微球的首选乳化剂，是制药行业不可或缺的药用辅料。

由于卵磷脂的用途广泛，有关卵磷脂的提取与纯化技术也已经有大量研究。

1980年Jorn^[1]采用色谱法生产出以鲜鸡蛋为原料的高纯度卵磷脂产品，其纯度可达化学纯标准。其采用体积分数为96％的乙醇提取，同时并使用了氯化镉和乙醚。而纯化过程以Al2O3为柱材料，二氯甲烷和甲醇为洗脱剂。

1999年Sim^[2]研究了乙醇溶剂法生产卵黄卵磷脂工艺，并采用低温冷藏工序来去除中性脂肪，可提出至少86％的磷脂。此法将溶剂提取法和超临界萃取相结合，提取蛋黄卵磷脂。提过过程只采用了一种单一溶剂乙醇，方法简便。但与超临界萃取相结合，过程繁复。

2003年西北大学的赵彬侠等人^[3]用柱层析法分离纯化蛋黄卵磷脂，其采用蛋黄磷脂为原料在硅胶柱上进行分离，并以氯仿甲醇混合液梯度洗脱。

2009年江南大学食品学院的杨严俊博士申请了题为《高纯度蛋黄卵磷脂及其生产方法与它们的用途》的专利^[4]，主要采用了乙醇萃取，而后用环糊精脱除胆固醇与低温冷藏分离蛋黄油的技术，得到了含量达到90～98％的蛋黄总磷脂，并含有1.5％左右的叶黄素。

[1]Jom R.Nielsen.A Lipids，1980，15(6)：480～484

[2]Sim J S.New extraction and fraction method for lecithin and natural oil from egg yolk.Nakai：CAB International，2001.129～138

[3]赵彬侠等，用柱层析法分离纯化蛋黄卵磷脂，西北大学学报(自然科学版)2003，Vol.33P171～173

[4]杨严俊等，ZL200910136630.0

上述已公开的提取方法，由于产品纯度达不到药用级卵磷脂的要求，或受限于设备的操作规模或有毒有害溶剂的使用等问题，均不宜作为药用辅料注射用高纯度卵磷脂的大规模生产工艺进行推广和使用。

发明内容

本专利涉及一种环境友好的，以模拟移动床连续色谱分离的方式进行的，相对廉价的，高效率的，注射用高纯度卵磷脂的清洁生产工艺。更为独特的是，它涉及一种经过改进的工艺，这种工艺以乙醇水溶液为卵磷脂的提取溶剂与模拟移动床连续色谱分离系统的洗脱剂，通过模拟移动床连续色谱分离，确保卵磷脂与原料脂质中其他组分的彻底分离，得到纯度达到药典要求(PC≥98％)的注射用高纯度卵磷脂产品，同步实现其他组分作为副产物的回收以及溶剂的循环回用。按照本专利进行操作，与此前的传统方法相比，能够以经济可行的方法连续分离纯化，使产品的收率以及产品纯度均提高到98％以上的水平，确保卵磷脂产品的品质满足药用辅料的技术要求，使生产成本大幅度降低，彻底杜绝废水和废渣的产生，实现卵磷脂生产的清洁化、无污染化。以上这些改进对于注射用高纯度卵磷脂的生产而言是至关重要的。

本发明的最重要的目的之一，就是要解决卵磷脂与原料脂质中其他组分，尤其是溶血磷脂，的连续、彻底分离问题，以确保产品的使用安全。作为一个顺带的结果，本发明的另一个目的，是要实现溶剂的无毒无害化，实现卵磷脂的环境友好化生产。

具体来说，首先，我们发现，以乙醇水溶液为洗脱剂，采用模拟移动床色谱分离系统，可以有效地将待分离混合物中的卵磷脂跟脑磷脂、溶血磷脂、色素、胆固醇等其他成分彻底分离，得到不含任何其他磷脂组分的纯度极高的卵磷脂。由此奠定了以乙醇为洗脱剂的卵磷脂分离纯化工艺的基础。