[发明专利]一种间充质干细胞注射液及其制备方法和在制备治疗儿童扩张型心肌病药物中的应用

权利要求书

1.一种间充质干细胞注射液，其特征在于它包括以下组分：

含量为2×10⁵-1×10⁷个/ml的间充质干细胞；

体积比为5-8%的临床级DMSO；

质量体积比为1-6%的人血白蛋白；

余量为复方电解质溶液。

2.根据权利要求1所述的间充质干细胞注射液，其特征在于：所述间充质干细胞来源于人脐带和/或人胎盘。

3.根据权利要求1所述的间充质干细胞注射液，其特征在于：所述间充质干细胞活力保持在85%以上。

4.根据权利要求1所述的间充质干细胞注射液的制备方法，其特征在于配制体积比为5-8%的DMSO、质量体积比为1-6%的人血白蛋白和复方电解质溶液，将间充质干细胞重悬于上述溶液中制成单细胞悬液，使干细胞数量为2×10⁵-1×10⁷个/ml。

5.根据权利要求4所述的间充质干细胞注射液的制备方法，其特征在于所述脐带间充质干细胞的制备包括以下步骤：

(1).新鲜足月健康胎儿脐带，用含100kU/L青霉素及100mg/L链霉素的PBS缓冲液冲洗；

(2).剪取3-15cm长脐带，将脐带剪成1-2cm长的小段，用所述PBS缓冲液反复冲洗；

(3).将脐带组织块剪碎成5mm³小块；

(4).将剪碎组织加入L-DMEM培养基洗涤，在500-700g条件下离心5分钟，弃上清；

(5).将组织块和培养基按体积比2-3：1比例混匀，接种至细胞培养皿中，置培养箱培养；所述的培养基为MSC专用无血清培养基；

(6).每3天换一次培养基，细胞达80%左右融合时传代；传代培养基为MSC专用无血清培养基。

6.根据权利要求4所述的间充质干细胞注射液的制备方法，其特征在于所述胎盘间充质干细胞的制备包括以下步骤：

(1).用含100kU/L青霉素、100mg/L链霉素和50u/ml肝素钠的PBS缓冲液冲洗胎盘，将胎盘剪成3-10mm³小块；

(2).将胎盘组织块用上述含青霉素和链霉素的DMEM培养基混匀，在700-900g条件下离心10min；

(3).弃上清，每管加含体积比0.25%胰蛋白酶的DMEM培养基于37℃消化10min，在850g条件下离心10min；

(4).保留上清，过滤网后收集的滤过液在2200rpm条件下离心10min；

(5).弃上清，用MSC专用无血清培养基重悬细胞，接种于培养皿培养；每3天进行半量换液；

(6).细胞融合至80-90%进行细胞传代，传代培养基为MSC专用无血清培养基。

7.根据权利要求1所述的间充质干细胞注射液在制备治疗儿童扩张型心肌病药物中的应用。

8.根据权利要求7所述的间充质干细胞注射液在制备治疗儿童扩张型心肌病药物中的应用，其特征在于：含有间充质干细胞注射液药物的用量为含有1×10⁶-1×10⁸个/ml间充质干细胞。