[发明专利]环氧化物水解酶基因、编码酶、载体、工程菌及应用有效

专利信息
申请号: 201210455073.0 申请日: 2012-11-13
公开(公告)号: CN102978220A 公开(公告)日: 2013-03-20
发明(设计)人: 郑裕国;薛锋;柳志强;邹树平;胡忠策;沈寅初 申请(专利权)人: 浙江工业大学
主分类号: C12N15/55 分类号: C12N15/55;C12N9/14;C12N15/63;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12P41/00;C12P17/02
代理公司: 杭州天正专利事务所有限公司 33201 代理人: 黄美娟;王兵
地址: 310014 浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 环氧化物 水解 基因 编码 载体 工程 应用
【权利要求书】:

1.一种环氧化物水解酶基因,其特征在于所述环氧化物水解酶基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示。

2.一种由权利要求1所述环氧化物水解酶基因编码的环氧化物水解酶。

3.如权利要求2所述的环氧化物水解酶,其特征在于所述环氧化物水解酶的氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示。

4.一种含权利要求1所述环氧化物水解酶基因的重组载体。

5.一种由权利要求4所述重组载体转化得到的重组基因工程菌。

6.一种权利要求1所述环氧化物水解酶基因在制备重组环氧化物水解酶中的应用。

7.如权利要求6所述的应用,其特征在于所述的应用为:将含所述环氧化物水解酶基因构建载体,再将载体转化大肠杆菌,获得的重组基因工程菌进行诱导培养,培养液分离获得含环氧化物水解酶的菌体细胞。

8.一种含权利要求2所述环氧化物水解酶基因的环氧化物水解酶在制备手性环氧化物中的应用,其特征在于所述应用为:以含环氧化物水解酶的重组基因工程菌经诱导培养获得的湿菌体为酶源,以外消旋环氧化物为底物,于pH 6~10缓冲液的反应体系中进行转化反应,在20~ 40℃条件下转化反应结束后,获得的转化反应液即为含手性环氧化物的混合液,将混合液分离纯化,获得手性环氧化物。

9.如权利要求8所述含权利要求1所述环氧化物水解酶基因的环氧化物水解酶在制备手性环氧化物中的应用,其特征在于所述应用为:以含环氧化物水解酶的重组基因工程菌经诱导培养获得的湿菌体为酶源,以外消旋环氧化物为底物,于pH 6~10缓冲液的反应体系中进行转化反应,在20~ 40℃、50~250r/min条件下转化反应0.05~ 4h,反应结束后,获得的转化反应液即为含手性环氧化物的混合液,将混合液分离纯化,获得手性环氧化物;所述底物的初始浓度为0.05~80g/L,所述湿菌体的质量用量以菌体干重计为0.05~ 0.4g/g底物。

10.如权利要求8或9所述含权利要求1所述环氧化物水解酶基因的环氧化物水解酶在制备手性环氧化物中的应用,其特征在于所述底物为外消旋环氧氯丙烷或外消旋苯基环氧乙烷。

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