[发明专利]一种用于检测溶血性链球菌的核酸适体、互补序列及检测方法无效
申请号: | 201210408827.7 | 申请日: | 2012-10-12 |
公开(公告)号: | CN102994633A | 公开(公告)日: | 2013-03-27 |
发明(设计)人: | 彭新凯;李乐;聂静苑;钟菲菲;刘子音;黄亮;杨丽霞;夏立新 | 申请(专利权)人: | 湖南省食品安全生产工程技术研究中心 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/14;C12Q1/06;C12N15/115;C12N15/11;G01N21/64 |
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地址: | 410013 湖*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 溶血 链球菌 核酸 互补 序列 方法 | ||
1.一种用于检测溶血性链球菌的核酸适体及其互补序列,其特征在于:核酸适体的序列命名为序列A,互补序列命名为序列B,具体序列如下:
序列A:5’-CAGATGCACACGCTGAAGAAA
CTGAGGTCGTAGGTTTTCTTCGGG-3’;
序列B:5’-CGTGTGCATCTGAAAAAAAAAA-SH3’;
其中序列A的5’端标记有荧光报告基团。
2.根据权利要求1所述的核酸适体及其互补序列,其特征在于,所述的荧光报告基团为FAM。
3.一种用于检测溶血性链球菌的检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)采用常规方法制备纳米金颗粒;
2)纳米金颗粒与权利要求1或2所述的互补序列反应,形成互补寡核苷酸的纳米金颗粒覆盖体;
3)将步骤2制备的互补寡核苷酸的纳米金颗粒覆盖体,与权利要1或2所述的核酸适体反应,覆盖体上的纳米金颗粒猝灭核酸适体上的荧光报告基团发出的荧光信号;
4)在步骤3的反应体系中,加入溶血性链球菌,溶血性链球菌与核酸适体特异性结合,使其与覆盖有纳米金颗粒的互补寡核苷酸分离,释放出的核酸适体标记的荧光报告基团使荧光信号重新恢复。
4.根据权利要求3所述的一种用于检测溶血性链球菌的检测方法,其特征在于所述的荧光信号是用荧光分光光度计测量的,其最低检测限为33CFU/ml。
5.根据权利要求3或4所述的一种用于检测溶血性链球菌的检测方法,其特征在于:所述的溶血性链球菌为β-溶血性链球菌。
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