[发明专利]一种纯化藤黄酮E的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然产物分离领域，涉及一种纯化藤黄酮E的方法。

背景技术

藤黄酮E（Guttiferone E ），分子式C₃₈H₅₀O₆，分子量602.81，是从藤黄科(Guttiferae)植物卵叶藤黄Garcinia ovalifolia Oliv.的叶提取分离的一种氧杂蒽酮衍生物类活成分。藤黄酮E具有免疫调节、抗突变和抗癌等药理学作用，对多种癌细胞株均具有强烈的细胞毒性，与一些常用癌症化学治疗药物比较，藤黄酮E对癌细胞的毒性仅次于紫杉醇。藤黄酮E还具有抗HIV活性，能抑制人淋巴细胞受HIV感染，其ED50为1-10μg/ml。

经文献检索，国内尚未发现采用藤黄酮E的工业方法的相关报道。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术的不足，提供一种纯化藤黄酮E的方法，工艺操作简单，所得产品含量高。

本发明技术解决方案如下：

一种纯化藤黄酮E的方法，其特征在于包括以下步骤：

1）取卵叶藤黄的干燥叶粉碎，加6-10倍量70-80%乙醇溶液微波提取2-3次，微波功率为800-1000W，提取液减压浓缩，浓缩液加入有机溶剂萃取，收集有机相浓缩，得浓缩液；

2）浓缩液加聚酰胺树脂拌样，加入聚酰胺柱吸附，乙醇溶液洗脱，薄层检测，收集流分减压浓缩，得到粗品；

3）以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，上述粗品采用高速逆流色谱分离，紫外检测器检测，收集目标流分，浓缩，放置结晶，干燥即得藤黄酮E。

所述步骤1）中的有机溶剂为乙酸乙酯。

所述步骤2）中的乙醇溶液浓度为60-70%。

所述步骤3）中石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水体积比为（3-4）:（5-6）:（5-7）:（2-3）。

本发明的技术优势在于采用高速逆流色谱法，可以减少纯化步骤，缩短生产周期，工艺易重现，产品收率高；聚酰胺分离和混合溶液结晶替代硅胶柱层析，使工艺易于重现和放大，实现了高含量藤黄酮E产品的工业化，为开展藤黄酮E更广泛用途奠定了基础。

具体实施方式：

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

实施例1：

取卵叶藤黄的干燥叶粉碎，称量10kg，加6倍量80%乙醇微波提取20min，提取2次，微波功率为800W，合并滤液减压浓缩至无醇，得浓缩液，用等体积乙酸乙酯萃取，离心，收集有机相浓缩，浓缩液干法上样，加入2L聚酰胺柱吸附，用6L70%乙醇溶液洗脱，薄层检测，收集高浓度流分，减压浓缩，得到粗品。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，按4:6:5:3比例混合，静置分层，取上相泵入色谱管，开启高速逆流色谱仪，调整转速为850rpm，同时把下相以3ml/min流速泵入，取上相溶液溶解粗品，进样，紫外检测器监测，监测波长为280nm，收集流分，减压浓缩后，放置结晶，滤出结晶物干燥，得藤黄酮E29.5g，经高效液相检测，藤黄酮E含量为98.4%。

实施例2：

取卵叶藤黄的干燥叶粉碎，称量10kg，加8倍量80%乙醇微波提取20min，提取2次，微波功率为1000W，合并滤液减压浓缩至无醇，得浓缩液，用等体积乙酸乙酯萃取，离心，收集有机相浓缩，浓缩液干法上样，加入2L聚酰胺柱吸附，用8L65%乙醇溶液洗脱，薄层检测，收集高浓度流分，减压浓缩，得到粗品。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水，按3:5:7:3比例混合，静置分层，取上相泵入色谱管，开启高速逆流色谱仪，调整转速为850rpm，同时把下相以3ml/min流速泵入，取上相溶液溶解粗品，进样，紫外检测器监测，监测波长为280nm，收集流分，减压浓缩后，放置结晶，滤出结晶物干燥，得藤黄酮E32.2g，经高效液相检测，藤黄酮E含量为98.3%。

实施例3：