[发明专利]一种利用树干毕赤酵母固态发酵生产木聚糖酶的方法无效
申请号: | 201210365664.9 | 申请日: | 2012-09-27 |
公开(公告)号: | CN103695391A | 公开(公告)日: | 2014-04-02 |
发明(设计)人: | 丁长河;胡玉琪;杨盛茹;陈复生;徐云清 | 申请(专利权)人: | 河南工业大学 |
主分类号: | C12N9/42 | 分类号: | C12N9/42;C12R1/84 |
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地址: | 450001*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 树干 酵母 固态 发酵 生产 聚糖 方法 | ||
1.一种利用树干毕赤酵母固态发酵生产木聚糖酶的方法,其特征在于:
(1) 以树干毕赤酵母(Pichia stipitis)作为固态发酵菌种;
(2) 以玉米芯和小麦麸皮作为固态发酵基质;
2.权利要求1所述的一种利用树干毕赤酵母固态发酵生产木聚糖酶的方法,其步骤如下:
(1) 将玉米芯和小麦麸皮粉碎过筛,以玉米芯与麸皮质量比1:6~6:1配制固态发酵培养基,添加少量水至培养基含水量74%~80%;
(2) 将配制好的固态培养基于121℃灭菌30min,冷却;
(3) 将采用YEPX液体培养基在28℃、100 rpm条件下培养3天的树干毕赤酵母种子培养液,按5%体积比例的接种量接种于固态培养基中,搅拌混合,轻轻压实,使得培养基厚度达到5~10厘米,在28℃下培养9天;
(4) 发酵完成的固态培养物加入6~10倍体积的Tris-HCl缓冲液中,搅拌混合振荡均匀,离心后去除沉淀。上清液经超滤浓缩后添加稳定剂和防腐剂后包装,即为液态木聚糖酶;
(5) 发酵完成的固态培养物经过真空低温干燥、粉碎和包装即为固态木聚糖酶。
3.根据权利要求2所述的玉米芯和小麦麸皮,其特征在于玉米芯和小麦麸皮分别粉碎后,分别过20目筛,取筛下物。
4.根据权利要求2所述的Tris-HCl缓冲液,其特征在于Tris-HCl缓冲液的浓度为0.05 mol/L, pH值为8.0。
5.根据权利要求2所述的YEPX液体培养基,其配方为(每升):酵母膏10克,蛋白胨20克,木糖20克,去离子水970克。
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