[发明专利]一种用光子晶体微球流式芯片检测真菌毒素的方法有效
申请号: | 201210359576.8 | 申请日: | 2012-09-25 |
公开(公告)号: | CN102879570A | 公开(公告)日: | 2013-01-16 |
发明(设计)人: | 李建林;邓国哲;徐坤;孙越;陈宇 | 申请(专利权)人: | 南京师范大学 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N21/64 |
代理公司: | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人: | 卢亚丽 |
地址: | 210000 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用光 晶体 微球流式 芯片 检测 真菌 毒素 方法 | ||
1.一种用光子晶体微球流式芯片检测真菌毒素的方法,其特征在于,采用光子晶体微球为真菌毒素探针载体,在微球表面进行直接竞争免疫检测多个真菌毒素,以黄曲霉毒素、伏马毒素和桔青霉毒素为检测对象,通过异硫氰酸荧光素标记抗体与微球表面固定抗原竞争各自的抗原,利用共聚焦荧光扫描仪和光子晶体的反射光谱进行解码,对三种真菌毒素同时检测。
2.根据权利要求1所述的方法,包括以下步骤:
(1)光子晶体微球的制备;
(2)光子晶体微球表面的修饰:通过体积比3:7的双氧水与浓硫酸对步骤(1)得到的微球表面进行羟基化修饰,再用γ-缩水甘油氧丙基三甲氧基硅烷对微球表面进行环氧基修饰;
(3)抗体标记:通过化学键合方法将黄曲霉毒素、伏马毒素和桔青霉毒素人工抗原固定于经步骤(2)表面修饰的微球表面;
(4)用光子晶体微球流式芯片对待测样品进行竞争免疫检测;利用共聚焦荧光扫描仪和光子晶体的反射光谱进行解码。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于步骤(2)中γ-缩水甘油氧丙基三甲氧基硅烷微球表面进行环氧基修饰时,110℃下烘干45-60mins。
4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于所述黄曲霉毒素、伏马毒素和桔青霉毒素人工抗原包被浓度分别为240ng/mL、250ng/mL、260ng/mL,各自抗体反应浓度为1.65,0.95和1.4μg/mL。
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