[发明专利]一种难溶于水的丝素蛋白膜及其制备与应用无效
申请号: | 201210345312.7 | 申请日: | 2012-09-17 |
公开(公告)号: | CN102847198A | 公开(公告)日: | 2013-01-02 |
发明(设计)人: | 陈隆坤;其他发明人请求不公开姓名 | 申请(专利权)人: | 浙江星月生物科技股份有限公司 |
主分类号: | A61L27/22 | 分类号: | A61L27/22;A61L15/32;A61L31/04 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;王兵 |
地址: | 311121 浙江省杭*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 丝素 蛋白 及其 制备 应用 | ||
1.一种难溶于水的丝素蛋白膜,其特征在于所述丝素蛋白膜按如下方法制备:(1)以桑蚕丝为原料,经脱胶、溶解、透析,获得截留液a,将截留液a或截留液a的浓缩液过滤或离心,取滤液或上层离心液得到丝素蛋白溶液;(2)取步骤(1)得到的丝素蛋白溶液,将丝素蛋白溶液的质量浓度用水调整至0.3~30%,倒入模具内,所述模具内丝素蛋白溶液加入量以丝素蛋白质量计为1~50mg/cm2模具,将模具在温度5~60℃,相对湿度10~70%条件下干燥至无肉眼可见的水分,在模具内形成丝素蛋白膜;(3)将模具在温度50~100℃,相对湿度70~100%条件下放置20~200min进行湿热交联,然后置于体积浓度50~90%的乙醇水溶液中浸洗10~60min,去除模具,丝素蛋白膜再用纯化水充分浸洗30~150min至无醇,获得难溶于水的丝素蛋白膜。
2.如权利要求1所述的难溶于水的丝素蛋白膜,其特征在于步骤(1)所述截留液a的浓缩液制备方法为:将透析后的透析袋放入质量浓度20~60%的聚乙二醇水溶液中,静置1~10h,取截留液b即为截留液a的浓缩液;所述聚乙二醇平均分子量1000~10000。
3.如权利要求1所述的难溶于水的丝素蛋白膜,其特征在于步骤(1)所述截留液a或截留液a的浓缩液过滤或离心方法为下列之一:a)将截留液a或截留液a的浓缩液于4℃、3000~6000g条件下离心5~20min,弃去沉淀,取上层溶液即为所述的丝素蛋白溶液;b)将截留液a或截留液a的浓缩液用孔径为2~20μm的滤器过滤,去除不溶性颗粒,滤液即为所述的丝素蛋白溶液。
4.如权利要求1所述的难溶于水的丝素蛋白膜,其特征在于步骤(2)所述模具为底部光滑平整且水平的模具。
5.如权利要求1或4所述的难溶于水的丝素蛋白膜,其特征在于步骤(2)所述模具利用浮法玻璃制成的底部光滑平整且水平的模具,所述模具内质量浓度0.3~30%的丝素蛋白溶液的加入量以丝素蛋白质量计为1~50mg/cm2模具,将模具在温度5~60℃,相对湿度10~70%条件下干燥至无肉眼可见的水分,在模具内形成表面光滑的丝素蛋白膜;将模具在温度50~100℃,相对湿度70~100%条件下放置20~200min进行湿热交联,然后置于体积浓度50~90%的乙醇水溶液中浸洗10~60min,去除模具,丝素蛋白膜再用纯化水充分浸洗30~150min,获得难溶于水的双滑型丝素蛋白膜。
6.如权利要求1所述的难溶于水的丝素蛋白膜,其特征在于步骤(2)所述模具为底部毛糙且水平的模具。
7.如权利要求1或6所述的难溶于水的丝素蛋白膜,其特征在于步骤(2)所述模具底部为浮法玻璃经磨砂获得粗糙面的模具,所述模具内质量浓度0.3~30%的丝素蛋白溶液的加入量以丝素蛋白质量计为1~50mg/cm2模具,将模具在温度5~60℃,相对湿度10~70%条件下干燥至无肉眼可见的水分,在模具内形成一面光滑,一面粗糙的丝素蛋白膜;将模具在温度50~100℃,相对湿度70~100%条件下放置20~200min进行湿热交联,然后置于体积浓度50~90%的乙醇水溶液中浸洗10~60min,去除模具,丝素蛋白膜再用纯化水充分浸洗30~150min,获得难溶于水的贴滑型丝素蛋白膜。
8.如权利要求1所述的难溶于水的丝素蛋白膜,其特征在于步骤(1)所述脱胶、溶解、透析方法为:a)脱胶:将100g桑蚕蚕丝放入4~8L的2M碳酸钠水溶液中,90~100℃水浴20~60min,纯水清洗,该过程重复3次,脱去丝胶蛋白,留下丝素蛋白,将丝素蛋白在20~60℃烘干,获得干燥后的丝素蛋白;b)溶解:将上述干燥后的丝素蛋白溶于9~11M的溴化锂水溶液中,55~65℃水浴30~300min至丝素蛋白充分溶解,获得含丝素蛋白的混合液;所述干燥后的丝素蛋白与溴化锂水溶液的质量体积比为0.1~0.2:1;c)透析:将含丝素蛋白的混合液用截留分子量1000~20000道尔顿的透析袋进行透析,用10倍混合液体积的无菌去离子水作为透析液在3天透析10~12次,去除溶液中的溴化锂成分,获得截留液a。
9.如权利要求1~8之一所述的难溶于水的丝素蛋白膜在制备防粘连膜、护创膜或人工膜中的应用。
10.如权利要求9所述的应用,其特征在于所述人工膜为引导骨再生膜、胸膜、硬脑膜、硬脊膜、鼓膜或眼角膜。
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