[发明专利]一种芡实蛋白及其制备方法有效
申请号: | 201210343409.4 | 申请日: | 2012-09-17 |
公开(公告)号: | CN102863522A | 公开(公告)日: | 2013-01-09 |
发明(设计)人: | 齐斌;王立梅;朱益波 | 申请(专利权)人: | 常熟理工学院 |
主分类号: | C07K14/415 | 分类号: | C07K14/415;C07K1/30 |
代理公司: | 江苏致邦律师事务所 32230 | 代理人: | 徐蓓 |
地址: | 215500 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 芡实 蛋白 及其 制备 方法 | ||
1.一种芡实蛋白的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:
(1)制备芡实果仁浆液;
(2)用碱性pH调节剂调节芡实果仁浆液的pH值,震荡提取,得到芡实蛋白的碱浸提液;
(3)将芡实蛋白的碱浸提液离心,分离上清液和沉淀;
(4)取上清液透析,用盐酸溶液调节透析液pH值,静置,离心,取沉淀,加入蒸馏水,搅拌均匀得到芡实蛋白分散液;
(5)用碱性pH调节剂调节芡实蛋白分散液的pH值,冷冻干燥,得芡实蛋白。
2.根据权利要求1所述的芡实蛋白制备方法,其特征在于,步骤(1)为:取新鲜的芡实果仁,加入NaCl溶液浸泡溶胀后,粉碎打浆,过150-250目筛,即得芡实果仁浆液。
3.根据权利要求2所述的芡实蛋白制备方法,其特征在于,所述NaCl溶液的体积为芡实果仁质量的6-12倍,NaCl溶液浓度为0.1-1.0mol/L,其中含0.02-0.08%亚硫酸钠,室温下浸泡时间为1-2h。
4.根据权利要求1所述的芡实蛋白制备方法,其特征在于,所述步骤2为:用0.2-0.8mol/L的氢氧化钠溶液将芡实果仁浆液的pH值调节至7-10,室温下震荡提取1-2h,震荡频率为30-4500r/min,得到芡实蛋白的碱浸提液。
5.根据权利要求1所述的芡实蛋白制备方法,其特征在于,步骤(3)所述的离心为25℃下,以2500-4000r/min的速度离心10-30min。
6.根据权利要求1所述的芡实蛋白制备方法,其特征在于,步骤(4)所述的透析使用大小为MWCO:8000-12000Da的透析袋,2-6℃下透析64-86h,所述盐酸溶液浓度为0.8-1.2mol/L,上清液的pH值调节至5.8-6.15,静置时间为2-4h,所述离心为2-6℃下,以8000-12000r/min的速度离心10-30min,离心后得到的沉淀加入蒸馏水的质量为沉淀质量的2-5倍。
7.根据权利要求1所述的芡实蛋白制备方法,其特征在于,步骤(5)中所述的碱性pH调节剂为氢氧化钠溶液,所述氢氧化钠溶液浓度为0.2-0.8mol/L,将芡实蛋白分散液的pH值调节至7-8。
8.根据权利要求1所述的芡实蛋白制备方法,其特征在于,步骤(5)中所述的冷冻干燥的凝冰温度为 -54℃ ,冷阱室内冷冻的搁板温度为 -20℃。
9.根据权利要求1所述的芡实蛋白制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:
(1)取新鲜的芡实果仁,加入体积为芡实果仁质量8倍的NaCl溶液室温浸泡溶胀1.5h后,粉碎打浆,过200目筛,即得芡实果仁浆液;所述NaCl溶液浓度为0.5mol/L,其中含0.05%亚硫酸钠;
(2)用0.5mol/L的氢氧化钠溶液将芡实果仁浆液的pH值调节至8.5,室温下震荡提取1.5h,得到芡实蛋白的碱浸提液;
(3)将芡实蛋白的碱浸提液在25℃下,以3200r/min的速度离心20min,分离上清液和沉淀;
(4)取上清液入MWCO:10000Da的透析袋,4℃下透析72h,用1.0mol/L的盐酸溶液将上清液的pH值调节至6.0,静置3h,在4℃下,以10000r/min的速度离心20min,取沉淀,加入沉淀质量的3.5倍的蒸馏水,搅拌均匀得到芡实蛋白分散液;
(5)用0.5mol/L的氢氧化钠溶液将芡实蛋白分散液的pH值调节至7.5,冷冻干燥,得芡实蛋白。
10.权利要求1-9任一项芡实蛋白制备方法所得的芡实蛋白。
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