[发明专利]一种组氨瑞林的合成方法

权利要求书

1.一种组氨瑞林的合成方法 ，包括以下步骤： 

a.以2-氯三苯甲基氯树脂为起始原料 ，在碱性条件下与芴甲氧羰基保护脯氨酸的羧基相连，得到芴甲氧羰基保护脯氨酸-2氯三苯甲基氯树脂；

b.其余8个氨基酸按照组氨瑞林依次合成；

c.全保护切肽：用全保护切割试剂裂解得全保护9肽片段；

d.用乙胺与全保护9肽片段在1-羟基苯并三唑的作用下获得全保护组氨瑞林片段；

e.裂解全保护组氨瑞林片段获得组氨瑞林粗品。

2.根据权利要求 1所述的合成方法，其特征在于步骤a具体内容如下：

取2-氯三苯甲基氯树脂用二氯甲烷浸泡，使树脂充分溶胀，吹干，然后加入接肽试剂溶解的芴甲氧羰基保护脯氨酸反应，吹干，分别用N,N-二甲基甲酰胺和甲醇洗涤吹干，获得芴甲氧羰基保护脯氨酸2-氯三苯甲基氯树脂；所用的接肽试剂N,N-二异丙基乙胺: N,N-二甲基甲酰胺体积比=1:15，2-氯三苯甲基氯树脂的体积浓度为5-20ml/g，芴甲氧羰基保护脯氨酸摩尔数为2-氯三苯甲基氯树脂的1.5-2倍。

3.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于步骤b具体内容如下：

  a.制备Fmoc-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂：

   在芴甲氧羰基保护脯氨酸-2氯三苯甲基氯树脂中加入脱保护试剂，反应，吹干，分别用N,N-二甲基甲酰胺和甲醇洗涤，吹干；加入用接肽试剂溶解的芴甲氧羰基保护精氨酸、O-(苯并三唑-1-氧)-N,N,N,N-四甲基脲鎓六氟硼酸盐和1-羟基苯并三唑的混合物，反应，吹干，分别用N,N-二甲基甲酰胺和甲醇洗涤，吹干，获得Fmoc-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂，所用的脱保护试剂 哌啶: N,N-二甲基甲酰胺体积比=1:4；所用的接肽试剂N,N-二异丙基乙胺: N,N-二甲基甲酰胺体积比=1:15；混合物中：芴甲氧羰基保护脯氨酸-2氯三苯甲基氯树脂的体积浓度为 5-20ml/g，芴甲氧羰基保护精氨酸的摩尔数为芴甲氧羰基保护脯氨酸-2氯三苯甲基氯树脂的2-3倍，芴甲氧羰基保护脯氨酸-2氯三苯甲基氯树脂的重量与脱保护试剂的的加入量的比例为：每克树脂加入5-20ml脱保护试剂；

b.制备Fmoc-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂

   在 Fmoc-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂中加入脱保护试剂，反应，吹干，分别用N,N-二甲基甲酰胺和甲醇洗涤，吹干；加入用接肽试剂溶解的Fmoc-Leu-OH、 O-(苯并三唑-1-氧)-N,N,N,N-四甲基脲鎓六氟硼酸盐和1-羟基苯并三唑的混合物，反应，吹干，分别用N,N-二甲基甲酰胺和甲醇洗涤，吹干，获得Fmoc-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂，所用的脱保护试剂 哌啶: N,N-二甲基甲酰胺体积比=1:4；所用的接肽试剂N,N-二异丙基乙胺: N,N-二甲基甲酰胺体积比=1:15；混合物中：Fmoc-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂的体积浓度为 5-20ml/g，Fmoc-Leu-OH的摩尔数为Fmoc-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂的2-3倍，Fmoc-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂的重量与脱保护试剂的的加入量的比例为：每克树脂加入5-20ml脱保护试剂；

c.制备Fmoc-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂

  在Fmoc-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂中加入脱保护试剂，反应，吹干，分别用N,N-二甲基甲酰胺和甲醇洗涤，吹干；加入用接肽试剂溶解的Fmoc-D-His(Bzl)-OH、O-(苯并三唑-1-氧)-N,N,N,N-四甲基脲鎓六氟硼酸盐和1-羟基苯并三唑的混合物，反应，吹干，分别用N,N-二甲基甲酰胺和甲醇洗涤，吹干，获得Fmoc-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂；所用的脱保护试剂哌啶: N,N-二甲基甲酰胺体积比=1:4；所用的接肽试剂N,N-二异丙基乙胺: N,N-二甲基甲酰胺体积比=1:15；混合物中：Fmoc-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂的体积浓度为 5-20ml/g，Fmoc-D-His(Bzl)-OH的摩尔数为Fmoc-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂的2-3倍，Fmoc-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂的重量与脱保护试剂的的加入量的比例为：每克树脂加入5-20ml脱保护试剂；

d.制备Fmoc-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂

  在Fmoc-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂中加入脱保护试剂，反应，吹干，分别用N,N-二甲基甲酰胺和甲醇洗涤，吹干；加入用接肽试剂溶解的Fmoc-Tyr(tbu))-OH、O-(苯并三唑-1-氧)-N,N,N,N-四甲基脲鎓六氟硼酸盐和1-羟基苯并三唑的混合物，反应，吹干，分别用N,N-二甲基甲酰胺和甲醇洗涤，吹干，获得Fmoc-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂；所用的脱保护试剂 哌啶: N,N-二甲基甲酰胺体积比=1:4；所用的接肽试剂N,N-二异丙基乙胺: N,N-二甲基甲酰胺体积比=1:15；混合物中：Fmoc-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂的体积浓度为 5-20ml/g，Fmoc-Tyr(tbu)-OH的摩尔数为Fmoc-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂的2-3倍，Fmoc-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂的重量与脱保护试剂的的加入量的比例为：每克树脂加入5-20ml脱保护试剂；

e.制备Fmoc-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂

 在Fmoc-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂中加入脱保护试剂，反应，吹干，分别用N,N-二甲基甲酰胺和甲醇洗涤，吹干；加入用接肽试剂溶解的Fmoc-Ser(tbu))-OH、O-(苯并三唑-1-氧)-N,N,N,N-四甲基脲鎓六氟硼酸盐和1-羟基苯并三唑的混合物，反应，吹干，分别用N,N-二甲基甲酰胺和甲醇洗涤，吹干，获得Fmoc-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂；所用的脱保护试剂 哌啶: N,N-二甲基甲酰胺体积比=1:4；所用的接肽试剂N,N-二异丙基乙胺: N,N-二甲基甲酰胺体积比=1:15；混合物中：   Fmoc-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC 树脂的体积浓度为 5-20ml/g，       Fmoc-Ser(tbu)-OH的摩尔数为Fmoc-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂的2-3倍，Fmoc-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂的重量与脱保护试剂的的加入量的比例为：每克树脂加入5-20ml脱保护试剂；

f.制备Fmoc-Trp(Boc)-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂  

     在Fmoc-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂中加入脱保护试剂，反应，吹干，分别用N,N-二甲基甲酰胺和甲醇洗涤，吹干；加入用接肽试剂溶解的Fmoc-Trp(Boc)-OH、O-(苯并三唑-1-氧)-N,N,N,N-四甲基脲鎓六氟硼酸盐和1-羟基苯并三唑的混合物，反应，吹干，分别用N,N-二甲基甲酰胺和甲醇洗涤，吹干，获得 Fmoc-Trp(Boc)-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂；所用的脱保护试剂 哌啶: N,N-二甲基甲酰胺体积比=1:4；所用的接肽试剂N,N-二异丙基乙胺: N,N-二甲基甲酰胺体积比=1:15；混合物中：     Fmoc-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC 树脂的体积浓度为 5-20ml/g，Fmoc-Trp(Boc)-OH的摩尔数为Fmoc-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂的2-3倍，      Fmoc-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂的重量与脱保护试剂的的加入量的比例为：每克树脂加入5-20ml脱保护试剂；

g.制备Fmoc-His(Trt)-Trp(Boc)-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂  

   在Fmoc-Trp(Boc)-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂中加入脱保护试剂，反应，吹干，分别用N,N-二甲基甲酰胺和甲醇洗涤，吹干；加入用接肽试剂溶解的Fmoc-His(Trt)-OH、O-(苯并三唑-1-氧)-N,N,N,N-四甲基脲鎓六氟硼酸盐和1-羟基苯并三唑的混合物，反应，吹干，分别用N,N-二甲基甲酰胺和甲醇洗涤，吹干，获得 Fmoc-His(Trt)-Trp(Boc)-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂；所用的脱保护试剂 哌啶: N,N-二甲基甲酰胺体积比=1:4；所用的接肽试剂N,N-二异丙基乙胺: N,N-二甲基甲酰胺体积比=1:15；混合物中：      Fmoc-Trp(Boc)-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂的体积浓度为 5-20ml/g，Fmoc-His(Trt)-OH的摩尔数为Fmoc-Trp(Boc)-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂的2-3倍，      Fmoc-Trp(Boc)-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂的重量与脱保护试剂的的加入量的比例为：每克树脂加入5-20ml脱保护试剂；

h.制备Pyr-His(Trt)-Trp(Boc)-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂  

  在Fmoc-His(Trt)-Trp(Boc)-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂中加入脱保护试剂，反应，吹干，分别用N,N-二甲基甲酰胺和甲醇洗涤，吹干；加入用接肽试剂溶解的Pyr、O-(苯并三唑-1-氧)-N,N,N,N-四甲基脲鎓六氟硼酸盐和1-羟基苯并三唑的混合物，反应，吹干，分别用N,N-二甲基甲酰胺和甲醇洗涤，吹干，获得 Pyr-His(Trt)-Trp(Boc)-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂；所用的脱保护试剂 哌啶: N,N-二甲基甲酰胺体积比=1:4；所用的接肽试剂N,N-二异丙基乙胺: N,N-二甲基甲酰胺体积比=1:15；混合物中：     Fmoc-His(Trt)-Trp(Boc)-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂的体积浓度为 5-20ml/g，Pyr的摩尔数为Fmoc-His(Trt)-Trp(Boc)-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂的2-3倍，     Fmoc-His(Trt)-Trp(Boc)-Ser(tbu)-Tyr(tbu)-D-His(Bzl)-Leu-Arg(pbf)-Pro-CTC树脂的重量与脱保护试剂的的加入量的比例为：每克树脂加入5-20ml脱保护试剂。