[发明专利]一种油橄榄叶提取物的制备方法及所用装置

说明书

技术领域

    本发明涉及天然产物化学有效成分提取纯化技术领域，涉及的是一种含高纯度的橄榄苦苷及总黄酮油橄榄叶提取物的制备工艺方法。

背景技术

油橄榄是木樨科，又名齐墩果，亚热带常绿乔木，耐旱，耐寒，是生长能力很强的长寿树种。主要分布在地中海国家，如希腊，意大利，西班牙等国家，现世界各地几乎均有栽培。20世纪60年代开始引入中国，现广泛分布地在云南、甘肃、广东、广西、四川、陕西等地。 

油橄榄因其果实能榨取橄榄油而闻名，橄榄油含有诸多的生物活性物质，如不饱和脂肪酸、维生素E、橄榄苦苷、羟基酪醇等。一些研究者发现橄榄叶中橄榄苦苷的含量明显高于果实和树皮。在过去，油橄榄叶就经常用做治疗疟疾。此外，还有的文献报道称橄榄叶提取物在美洲和欧洲用作膳食补充剂以增强免疫功能。但每年也有成千上万吨的因修剪和采收的废弃油橄榄叶没有得到充分利用而被直接燃烧或扔掉从而造成了环境的破坏。因此，对油橄榄叶的开发具有提高其附加值及保护环境等重要意义。

橄榄苦苷是一种裂环烯醚萜苷类多酚化合物，广泛存在于各种木犀科的木犀榄属、丁香属、女贞属等植物中，如油橄榄叶，素馨花，丁香花女贞叶中都含有橄榄苦苷。

橄榄苦苷含有诸多的药理活性，如抗氧化、抗炎、抗菌、抗病毒、抗癌、抗肿瘤和降血糖等，并逐渐应用于医药、保健食品、化妆品等行业且应用前景广阔。

橄榄苦苷分子量为540.5，CAS：32619-42-4，结构式如下：

目前，针对从油橄榄叶中提取分离橄榄苦苷的报道较多，但目前没有适合一种操作简单、时间短、效率高且适合工业化生产的工艺方法。在国内，从一些相关文献报道可知，研究橄榄苦苷的提取方法，主要有传统的热提取、超声波辅助提取，微波辅助、超临界CO₂提取等。而在国外，研究人员的研究主要集中于橄榄苦苷的生理活性，对其提取制备的方法鲜有报道，主要也是以热浸提及超声提取橄榄苦苷的研究为主。然而单一的提取方法往往存在各自内在的缺陷，如溶剂提取法耗能大，耗材多，耗时长，提取效率低，工业污染大；超临界CO₂萃取仪器投资费用高且难以应用于极性较强的物质及一次处理量较小；微波辅助提取，对溶剂有选择性(一般需使用极性溶剂)且产生的巨大热量可能至橄榄苦苷分解；超声辅助提取在提取过程中也会产生大量的热一方面也可能导致热敏性活性物质分解，另一方面增加杂质的含量。因此，常用单一的提取方法或多或少存在一定的弊端。中国专利200710107642.1公开了一种油橄榄叶提取物的生产工艺，使用乙醇或甲醇提取，温度为25~65℃，所用热提取时间为36~144 h，或超声提取20~180min，再经膜分离和离子交换分离纯化得到的橄榄苦苷含量仅为2-6%，中国专利201010181196.0公开了一种橄榄苦苷的制备方法，所使用超临界流体CO₂萃取方法，萃取时间为3 h，压力为60 Mpa，再经过AB-8大孔树脂和重结晶，最后橄榄苦苷的得率约98%。中国专利200910311350.9公开了一种橄榄叶提取物制备的方法，所需的提取时间为5~10 h，再经石油醚、乙酸乙酯萃取，反相柱液相制备，得到最后的橄榄苦苷含量超过90%，中国专利200910117588.8公开了从油橄榄叶中同步制备橄榄苦苷和橄榄总黄酮的工艺方法，所用提取时间为0.5~3 h。再通过串联的大孔树脂分离纯化后再干燥，最后得到的橄榄苦苷含量在20-90%范围内。而从一些国外专利可知，美国专利5714150公开了一种油橄榄叶提取物的制备方法，从油橄榄叶中在70%乙醇，提取时间至少4 h，20~80℃的温度下热提取橄榄苦苷，最后其含量在30-40%；美国专利20030152656公开了油橄榄叶提取物制备方法，油橄榄叶粉碎后，加入MgSO₄使其酶失活，再用非极性溶剂(石油醚、正己烷、氯仿和苯中的一种或几种的混合物)，并在70℃的温度下常压沸腾提取2 h，过滤再旋蒸以去除溶剂得浸膏1，再用水在常压沸腾下提取浸膏1，过滤、旋蒸，得到浸膏2，再加入乙醇和食品级的活性炭在常压沸腾下提取浸膏2，过滤，旋转蒸发浓缩，形成最后的浸膏产品3，总共所需的浸提时间约为48-72 h，最后油橄榄叶提取物中橄榄苦苷含量仅为6-10%。