[发明专利]一种β-地中海贫血突变荧光定量PCR检测试剂盒

权利要求书

1.一种β-地中海贫血突变荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，包括PCR混合反应液、阳性对照品和用于检测β-地中海贫血突变基因型的荧光探针，所述PCR混合反应液中包含扩增突变位点所处基因区段的PCR引物。

2.根据权利要求1所述的β-地中海贫血突变荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，所述突变位点包括β-珠蛋白基因第41/42位氨基酸对应的碱基缺失突变、β-珠蛋白基因第二个内含子的第654位对应的C→T碱基突变、β-珠蛋白基因第17位氨基酸对应的A→T碱基突变、β-珠蛋白基因启动子上游第28位对应的A→G碱基突变、β-珠蛋白基因第71/72位氨基酸对应的+A碱基插入突变、β-珠蛋白基因第一个内含子的第5位对应的G→C碱基突变中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的β-地中海贫血突变荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，所述PCR引物包括以下两组引物对中的至少一组：

针对β-珠蛋白基因第41/42位氨基酸对应的突变位点所处区域的引物对，其PCR正向引物的序列如SEQ ID NO:1所示，PCR反向引物的序列如SEQ ID NO:2所示；

针对β-珠蛋白基因第二个内含子的第654位对应的突变位点所处区域的引物对，其PCR正向引物的序列如SEQ ID NO:5所示，PCR反向引物的序列如SEQ ID NO:6所示；

针对β-珠蛋白基因启动子上游第28位对应的突变位点所处区域的引物对，其PCR正向引物的序列如SEQ ID NO:9所示，PCR反向引物的序列如SEQ ID NO:10所示；

针对β-珠蛋白基因第17位氨基酸对应的突变位点所处区域的引物对，其PCR正向引物的序列如SEQ ID NO:13所示，PCR反向引物的序列如SEQ ID NO:14所示；

针对β-珠蛋白基因第71/72位氨基酸对应的突变位点所处区域的引物对，其PCR正向引物的序列如SEQ ID NO:17所示，PCR反向引物的序列如SEQ ID NO:18所示；

针对β-珠蛋白基因第一个内含子的第5位对应的突变位点所处区域的引物对，其PCR正向引物的序列如SEQ ID NO:21所示，PCR反向引物的序列如SEQ ID NO:22所示。

4.根据权利要求1所述的β-地中海贫血突变荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，所述荧光探针包括如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:24所示的核苷酸序列中的至少一种。

5.根据权利要求4所述的β-地中海贫血突变荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于，所述荧光探针包括以下探针组合中的至少一组：

检测β-珠蛋白基因第41/42位氨基酸对应的突变位点和对应区域的野生型基因的探针组合SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4；

检测β-珠蛋白基因第二个内含子的第654位对应的突变位点和对应区域的野生型基因的探针组合SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8；

检测β-珠蛋白基因启动子上游第28位对应的突变位点和对应区域的野生型基因的探针组合SEQ ID SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12；

检测β-珠蛋白基因第17位氨基酸对应的突变位点和对应区域的野生型基因的探针组合SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16；

检测β-珠蛋白基因第71/72位氨基酸对应的突变位点和对应区域的野生型基因的探针组合SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:20；

检测β-珠蛋白基因第一个内含子的第5位对应的突变位点和对应区域的野生型基因的探针组合SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:24。