[发明专利]一种从猪血中提取生物活性物质的联产方法无效
申请号: | 201210296534.4 | 申请日: | 2012-08-20 |
公开(公告)号: | CN102942628A | 公开(公告)日: | 2013-02-27 |
发明(设计)人: | 邹国庆;吴明文;卢进峰;徐宝海;姚远新 | 申请(专利权)人: | 淮北恩彼饲料有限公司 |
主分类号: | C07K16/06 | 分类号: | C07K16/06;C07D487/22;C12N9/08;C12P21/06 |
代理公司: | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人: | 董一宁 |
地址: | 235000 *** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 猪血 提取 生物 活性 物质 联产 方法 | ||
1.一种从猪血中提取生物活性物质的联产方法,其特征在于:包括免疫球蛋白G的提取、血红素铁和蛋白肽的提取和SOD的提取;其中:免疫球蛋白的提取是取新鲜猪血分离所得血浆,第一步盐析去除纤维蛋白获得血清,后续重复三次盐析提取免疫球蛋白G的粗提物,经过超滤浓缩得到免疫球蛋白G浓缩液,低温喷雾干燥获得IgG喷干粉;血红素铁和蛋白肽的提取是取血球液破碎后,压滤得上清液,进行加热酶解,压滤分别收集上清液和沉淀,沉淀低温烘干即为血红素铁粉;将上清液活性炭脱色,压滤收集清液,再将清液喷雾干燥得到蛋白肽成品;SOD的提取是取血球液破碎后的残渣,萃取洗涤,压滤收集上清液得到粗酶液,丙酮分离后收集沉淀,再加热、丙酮洗涤后压滤收集沉淀,将沉淀乙醇洗涤冷冻干燥获得SOD。
2.根据权利要求1所述的一种从猪血中提取生物活性物质的联产方法,其特征在于:上述免疫球蛋白G的提取的具体过程是将血浆液用等体积PBS缓冲液稀释后然后,向其中搅拌缓慢加入固体硫酸铵,使其饱和度达20%-25%,完成后用氨水调节其pH值至5.2-6.0,常温静置30-60min,然后将混合溶液进行压滤,弃去沉淀;向上清液中搅拌缓慢加入固体硫酸铵,使其饱和度达35-40%,静置30-60min将混合溶液进行压滤收集沉淀,沉淀用PBS缓冲液溶解,重复上述步骤三次,所得沉淀即为免疫球蛋白粗提物;最后将该免疫球蛋白G粗提物进行超滤浓缩并低温喷雾干燥,即得免疫球蛋白G。
3.根据权利要求2所述的一种从猪血中提取生物活性物质的联产方法,其特征在于:上述免疫球蛋白G粗提物进行超滤浓缩和低温喷雾干燥的具体过程是:将免疫球蛋白G粗提物使用纯水液溶解后进行超滤除盐,溶解浓度为20%-50%,滤截留分子量为60000-100000道尔顿,操作压力为0.1-0.15MPa,进料温度为20-30℃,低温喷雾干燥的进口温度为160-170℃,出口温度为70-80℃。
4.根据权利要求1所述的一种从猪血中提取生物活性物质的联产方法,其特征在于:上述血红素铁和蛋白肽提取的具体过程是:将分离的血球液加入一倍的纯水进行快速搅拌充分破碎,压滤分别收集滤液和滤渣,将滤液调节pH至7.5-8.0并升温至55-60℃,加入复合酶进行酶解,酶解结束调节pH至5.5-6.0,静置30-60min后进行压滤,沉淀45-50℃烘干磨碎即为血红素铁,然后将上清液升温至60-65℃,加入溶液体积0.5-1.0‰的活性炭进行脱色30-60min,然后进行压滤,将上清液进行喷雾干燥即为蛋白肽成品。
5.根据权利要求4所述的一种从猪血中提取生物活性物质的联产方法,其特征在于:上述血红素铁和蛋白肽提取过程中复合酶为动物蛋白水解酶与风味酶,其比例为3-5:1。
6.根据权利要求4所述的一种从猪血中提取生物活性物质的联产方法,其特征在于:上述血红素铁和蛋白肽的提取过程中复合酶的添加量为原血球液体积的0.5-1.0‰,酶解12-15h,酶解过程中每1-2h调节pH至7.5-8.0。
7.根据权利要求4所述的一种从猪血中提取生物活性物质的联产方法,其特征在于:上述血红素铁和蛋白肽的提取过程中喷雾干燥的进口温度220-240℃,出口温度85-95℃。
8.根据权利要求1所述的一种从猪血中提取生物活性物质的联产方法,其特征在于:上述SOD提取的具体过程是:将血球液破碎后的残渣加入等体积的蒸馏水,剧烈搅拌均匀4-6℃静置过夜,再加入0.2-0.25倍体积的预冷95%乙醇和0.1-0.15倍体积的预冷氯仿,搅拌30-45min静置1-2h,压滤收集上清液即为粗酶液;向粗酶液中加入0.15-0.2倍体积的预冷丙酮,压滤收集沉淀,然后向沉淀中加入0.1-0.15mol/L,pH值7.00-7.40的PBS缓冲液,55-60℃加热15-20min,迅速冷却至室温,压滤收集上清液,向上清液中缓慢加入0.15-0.18倍体积的预冷丙酮,生成白色沉淀,压滤收集沉淀,乙醇洗涤,冷冻干燥后,即得精制SOD。
9.根据权利要求8所述的一种从猪血中提取生物活性物质的联产方法,其特征在于:上述SOD提取具体过程中冷冻干燥条件为:干燥室压力为0.6-0.8Mpa。料层厚度为0.8-1.0cm,冷冻温度为-50--60℃。
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