[发明专利]虹鳟肠炎红嘴病的PCR检测方法及检测用引物

权利要求书

1.虹鳟肠炎红嘴病的PCR检测用引物，其特征在于虹鳟肠炎红嘴病的PCR检测用引物的上游引物YR-F的核苷酸序列为TGGAGGGGGATAACTACT，下游引物YR-R的核苷酸序列：ACATTTCACAACACGAGC。

2.如权利要求1所述虹鳟肠炎红嘴病的PCR检测用引物进行虹鳟肠炎红嘴病的PCR检测方法，其特征在于虹鳟肠炎红嘴病的PCR检测方法，按以下步骤进行：一、提取虹鳟肠炎红嘴病的病原鲁氏耶尔森氏菌的总DNA作为模板，根据Genbank数据库中Y.ruckeri16S rRNA基因序列(登录号：AB681666.1)，利用Primer Primier 5设计一对特异性引物，进行PCR扩增，获得扩增产物；二、PCR扩增产物经凝胶成像系统观察，若在946bp处有目的片段，则确定结果为阳性，若在946bp处没有目的片段，则确定结果为阴性，即完成虹鳟肠炎红嘴病的PCR检测；

其中步骤一中特异性引物的上游引物YR-F的核苷酸序列：5’-TGGAGGGGGATAACTACT-3’；下游引物YR-R的核苷酸序列：5’-ACATTTCACAACACGAGC-3’。

3.根据权利要求2所述的虹鳟肠炎红嘴病的PCR检测方法，其特征在于步骤一中PCR扩增的反应体系为25μL反应体系，由下列成分组成：

PCR扩增条件为：95℃预变性5min，94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸60s，共30个循环，再72℃延伸10min，4℃结束反应。