[发明专利]一种制备来匹卢定的方法

权利要求书

1.一种制备来匹卢定的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：取甘氨酸与CTC树脂偶联获得甘氨酸-CTC树脂；

步骤2：取所述甘氨酸-CTC树脂采用逐步偶联法分别获得片段-CTC树脂；

取所述片段-CTC树脂分别经第一裂解得到相应的片段；

步骤3：取谷氨酸与RinkAmide树脂偶联获得谷氨酸-RinkAmide树脂；

步骤4：取所述谷氨酸-RinkAmide树脂采用逐步偶联法获得片段-RinkAmide树脂；

步骤5：取所述片段-RinkAmide树脂采用片段偶联法将步骤2所述相应的片段依次偶联，获得Lepirudin-RinkAmide树脂；

步骤6：取所述Lepirudin-RinkAmide树脂经第二裂解获得Lepirudin线性粗肽，再经液相氧化、纯化、冻干，即得。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2中所述第一裂解的裂解时间为1～5h。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤6中所述第二裂解的裂解液中TFA、EDT、PhsMe、PhoMe、Tis与水的体积比为85～90：1～4：1～3：1～3：1～3：0～2。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤6中所述第二裂解的裂解时间为2～8h。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤6中所述液相氧化采用谷胱甘肽体系，pH值为7～9。

6.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤6中所述谷胱甘肽体系的浓度为0.1～1mg。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2中所述逐步偶联法采用固相偶联体系，所述固相偶联体系为DIC+HOBT/HOAT/Cl-HOBT或DIEA+HOBT/HOAT/Cl-HOBT+HBTU/HATU/PyBOP/PyAOP。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4中所述谷氨酸-RinkAmide树脂的替代度为0.1～0.3mmol/g。

9.一种制备来匹卢定的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：取甘氨酸与CTC树脂偶联获得甘氨酸-CTC树脂；

步骤2：取所述甘氨酸-CTC树脂采用逐步偶联法获得片段1-CTC树脂，所述片段1的序列如SEQ ID NO:1所示；

取所述甘氨酸-CTC树脂采用逐步偶联法获得片段2-CTC树脂，所述片段2的序列如SEQ ID NO:2所示；

取所述甘氨酸-CTC树脂采用逐步偶联法获得片段3-CTC树脂，所述片段3的序列如SEQ ID NO:3所示；

取所述甘氨酸-CTC树脂采用逐步偶联法获得片段4-CTC树脂，所述片段4的序列如SEQ ID NO:4所示；

取所述甘氨酸-CTC树脂采用逐步偶联法获得片段5-CTC树脂，所述片段5的序列如SEQ ID NO:5所示；

取所述片段1-CTC树脂、所述片段2-CTC树脂、所述片段3-CTC树脂、所述片段4-CTC树脂、所述片段5-CTC树脂分别经第一裂解得到相应的片段1、片段2、片段3、片段4、片段5；

步骤3：取谷氨酸与RinkAmide树脂偶联获得谷氨酸-RinkAmide树脂；

步骤4：取所述谷氨酸-RinkAmide树脂采用逐步偶联法获得片段6-RinkAmide树脂，所述片段6的序列如SEQ ID NO:6所示；

步骤5：取所述片段6-RinkAmide树脂采用片段偶联法将所述片段5、片段4、片段3、片段2、片段1依次偶联，获得Lepirudin-RinkAmide树脂，所述Lepirudin-RinkAmide树脂的序列如SEQ ID NO:7所示；

步骤6：取所述Lepirudin-RinkAmide树脂经第二裂解获得Lepirudin线性粗肽，再经液相氧化、纯化、冻干，即得。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，步骤2中所述第一裂解的裂解时间为1～5h。

11.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，步骤6中所述第二裂解的裂解液中TFA、EDT、PhsMe、PhoMe、Tis与水的体积比为85～90：1～4：1～3：1～3：1～3：0～2。