[发明专利]一种肽生物材料的纯化方法有效
| 申请号： | 201210214328.4 | 申请日： | 2012-06-27 |
| 公开（公告）号： | CN102718841A | 公开（公告）日： | 2012-10-10 |
| 发明（设计）人： | 唐青林;刘剑;王宇恩;马亚平;袁建成 | 申请（专利权）人： | 深圳翰宇药业股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K7/08 | 分类号： | C07K7/08;C07K1/16 |
| 代理公司： | 深圳市科吉华烽知识产权事务所 44248 | 代理人： | 韩英杰 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市南山区*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 生物 材料 纯化 方法 | ||
1.一种肽生物材料的纯化方法，所述肽生物材料为RAD-16I或RAD-16II，该方法包括以下步骤：
肽生物材料RAD-16I或RAD-16II采用三氟醋酸溶解，过滤得滤液；
以氰基硅烷键合硅胶为固定相的色谱柱，将步骤1）肽生物材料的滤液用纯水稀释上样；采用三氟醋酸水溶液为A相，以体积浓度为0.05%—0.4%三氟醋酸的乙腈为B相，线性梯度洗脱，收集目的峰馏分；
以甲基硅烷键合硅胶为固定相，将步骤2）得到的纯化样品上样；体积浓度为0.1%—0.2%TFA水溶液为A 相，体积浓度为0.1%—0.2%TFA的乙腈为B相，线性梯度洗脱，收集目的峰馏分；
以甲基硅烷键合硅胶为固定相的色谱柱，将步骤3）得到的纯化样品上样；以体积浓度为0.1%-0.2%，pH值5.0-7.0醋酸铵水溶液为A1 相，色谱纯乙腈为B相，梯度为（1-10）%B+(99-90)A1等梯度洗脱10-15min；然后再以0.1%-0.2%醋酸水溶液为A2相，色谱纯乙腈为B相，梯度为（1-10）%B+(99-90)A2等梯度洗脱10-15分钟，将样品洗脱下柱，收集目的峰馏分；干燥得精肽。
2.如权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：所述的步骤2）中将步骤1）肽生物材料用纯三氟醋酸溶解，所得的滤液用纯水稀释上样，稀释的倍数为0.5-5倍。
3.如权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：所述的步骤2）中B相的梯度为：1%-30%。
4.如权利要求1—3任意一项所述的纯化方法，其特征在于：所述的步骤3）中B相的梯度为：10%—40%。
5.如权利要求1—3任意一项所述的纯化方法，其特征在于：所述的步骤4）中将样品洗脱下柱，采用的洗脱液为50%A2+50%B。
6.如权利要求4所述的纯化方法，其特征在于：所述的步骤4）中将样品洗脱下柱，采用的洗脱液为50%A2+50%B。
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