[发明专利]一种人乳头瘤病毒(HPV)的分型定量检测方法及试剂盒有效
申请号: | 201210206564.1 | 申请日: | 2012-06-21 |
公开(公告)号: | CN102994647A | 公开(公告)日: | 2013-03-27 |
发明(设计)人: | 吴勇;孙婷婷 | 申请(专利权)人: | 宁波海尔施基因科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 315000 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 乳头 病毒 hpv 定量 检测 方法 试剂盒 | ||
1.一种人乳头瘤病毒(HPV)的分型定量检测方法,包括如下步骤:
(1)收集宫颈样品;
(2)样品DNA提取;
(3)以提取的DNA样品为模板进行PCR反应;
(4)以毛细电泳的方法分离样品。
2.根据权利要求1所述的检测方法,所述步骤(2)包括如下子步骤:
1)取500μL细胞保存液于1.5mL EP管中,13000g离心5分钟,去掉上清液,底部为宫颈脱落细胞;
2)向含有宫颈脱落细胞的EP管中加入500μL裂解液,裂解10分钟;
3)向裂解液中加入100μL磁珠吸附游离的DNA;
4)用清洗液将磁珠清洗两次;
5)100μL洗脱液洗脱DNA。
3.根据权利要求1所述的检测方法,所述步骤(3)包括按比例在样品板上加入试剂和样品、以及混匀后按一定温度进行热循环反应的子步骤。
4.根据权利要求3所述的检测方法,所述步骤(3)的子步骤中的热循环温度分别为94℃、60℃、70℃、4℃。
5.根据权利要求1所述的检测方法,所述步骤(4)包括制备GeXP遗传分析仪样品、准备分离液、毛细电泳分离样品、结果分析的步骤。
6.一种用于前述权利要求中的任一项所述的方法的试剂盒,包括以下试剂:引物管、溶液X、PCR缓冲剂、25mM氯化镁、聚合酶以及阳性对照。
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