[发明专利]一种人乳头瘤病毒(HPV)的分型定量检测方法及试剂盒有效

专利信息
申请号: 201210206564.1 申请日: 2012-06-21
公开(公告)号: CN102994647A 公开(公告)日: 2013-03-27
发明(设计)人: 吴勇;孙婷婷 申请(专利权)人: 宁波海尔施基因科技有限公司
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/68
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 315000 浙江*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 乳头 病毒 hpv 定量 检测 方法 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种人乳头瘤病毒(HPV)的分型定量检测方法,包括如下步骤:

(1)收集宫颈样品;

(2)样品DNA提取;

(3)以提取的DNA样品为模板进行PCR反应;

(4)以毛细电泳的方法分离样品。

2.根据权利要求1所述的检测方法,所述步骤(2)包括如下子步骤:

1)取500μL细胞保存液于1.5mL EP管中,13000g离心5分钟,去掉上清液,底部为宫颈脱落细胞;

2)向含有宫颈脱落细胞的EP管中加入500μL裂解液,裂解10分钟;

3)向裂解液中加入100μL磁珠吸附游离的DNA;

4)用清洗液将磁珠清洗两次;

5)100μL洗脱液洗脱DNA。

3.根据权利要求1所述的检测方法,所述步骤(3)包括按比例在样品板上加入试剂和样品、以及混匀后按一定温度进行热循环反应的子步骤。

4.根据权利要求3所述的检测方法,所述步骤(3)的子步骤中的热循环温度分别为94℃、60℃、70℃、4℃。

5.根据权利要求1所述的检测方法,所述步骤(4)包括制备GeXP遗传分析仪样品、准备分离液、毛细电泳分离样品、结果分析的步骤。

6.一种用于前述权利要求中的任一项所述的方法的试剂盒,包括以下试剂:引物管、溶液X、PCR缓冲剂、25mM氯化镁、聚合酶以及阳性对照。

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