[发明专利]一种脱细胞心包材料的制备方法

权利要求书

1.一种脱细胞心包材料的制备方法，包括：

（1）取健康成年动物的心脏，割取心包膜，热缺血时间小于1小时；然后在0-37℃下用无菌的生理盐水或pH值为6.8-8.6的磷酸盐缓冲液反复冲洗所得心包膜，在无菌条件下剥离外周脂肪，取无损伤、厚度均匀的前壁部分修剪为片状，用无菌的生理盐水或pH值为6.8-8.6的磷酸盐缓冲液充分漂洗，得到处理后的包心组织；

（2）将上述处理后的心包组织加入到含有烷基糖苷APG的溶液中，然后通过低渗处理或高渗处理，再经过核酶处理，最后清洗即可。

2.根据权利要求1所述的一种脱细胞心包材料的制备方法，其特征在于：步骤（1）中所述的成年动物为猪或牛。

3.根据权利要求1所述的一种脱细胞心包材料的制备方法，其特征在于：步骤（1）所述的片状的尺寸为6cm×8cm。

4.根据权利要求1所述的一种脱细胞心包材料的制备方法，其特征在于：步骤（1）得到的处理后的包心组织于4℃下保存在含双抗溶液的无菌的生理盐水中。

5.根据权利要求4所述的一种脱细胞心包材料的制备方法，其特征在于：所述的双抗溶液为100倍工作浓度的青霉素和硫酸链霉素溶液，其中青霉素的工作浓度范围为50-5000U/ml，硫酸链霉素的工作浓度范围为1-100mg/ml。

6.根据权利要求1所述的一种脱细胞心包材料的制备方法，其特征在于：步骤（2）中所述的含有烷基糖苷APG的溶液中APG的体积浓度小于50%；所述的烷基糖苷为0810、0814、1214、0816、1216、1618中的一种或几种。

7.根据权利要求1所述的一种脱细胞心包材料的制备方法，其特征在于：步骤（2）中所述的低渗处理为采用浓度为0.01M且pH值为6.8-8.6的无菌的Tris-HCI缓冲液，在1℃-25℃中振荡处理1-96小时，振荡速率为80-360rpm；所述的高渗处理为采用浓度为0.05M 且pH值为6.8-8.6的无菌的Tris-HCI缓冲液，在1℃-25℃中振荡处理1-96小时，振荡速率为80-360rpm。

8.根据权利要求1所述的一种脱细胞心包材料的制备方法，其特征在于：步骤（2）中所述的核酶处理为在37℃下，在含有100-10000u/ml的脱氧核糖核酸酶、100-10000u/ml核糖核酸酶、0.15M NaCl、1-5mM MgCl₂的无菌的pH值6.8-8.6为0.05M Tris-HCl缓冲液中，于60-360rpm转速下振荡处理6-72小时；其中所述的双抗为青霉素和硫酸链霉素。

9.根据权利要求1所述的一种脱细胞心包材料的制备方法，其特征在于：步骤（2）中所述的清洗是指用无菌的生理盐水或pH值为6.8-8.6的磷酸盐缓冲液在1℃-25℃条件下进行清洗，清洗时间为6-48小时。

10.根据权利要求9所述的一种脱细胞心包材料的制备方法，其特征在于：所述的无菌的生理盐水或pH值为6.8-8.6的磷酸盐缓冲液中含有抗生素。