[发明专利]一种肽聚糖单克隆抗体的制备及其产品

权利要求书

1.一种肽聚糖单克隆抗体制备及其产品，首先采用青霉素钠诱导法和葡聚糖G-100(Sephadex G-100)凝胶柱分离提取金黄色葡萄球菌的肽聚糖，接着免疫小鼠，制备单克隆抗体3F8，其特征为：IgG₁型免疫球蛋白，广谱性强，特异性强。使用3F8抗体，配合酶标二抗(羊抗鼠)，可以制备成试剂盒，其特征为：用来检测血清中革兰氏阳性菌的肽聚糖，作为临床诊断的参考之一。

2.根据权利要求1所述的金黄色葡萄球菌来源为中国科学院微生物研究所微生物菌种保藏管理中心。

3.根据权利要求1所述的肽聚糖纯化的步骤为采用青霉素钠诱导法和葡聚糖G-100(Sephadex G-100)凝胶柱分离提取金黄色葡萄球菌肽聚糖。

4.根据权利要求3所述的肽聚糖纯化的青霉素诱导法为用青霉素诱导金黄色葡萄球菌向环境中分泌出肽聚糖，青霉素溶液浓度为10mg/ml，诱导条件为37℃、200转/min振荡1h。

5.根据权利要求3所述的肽聚糖的葡聚糖G-100(Sephadex G-100)凝胶柱分离提取为分子筛层析，采用Sephadex G-100介质，紫外检测波长为215nm，用三蒸水进行洗脱，收集第一个峰。

6.根据权利要求1所述的制备的肽聚糖单克隆抗体3F8的特异性强，其特征为：对酵母来源的1，3-β-D-葡聚糖，大肠杆菌的脂多糖和大肠杆菌的肽聚糖均不发生特异性反应，而对金黄色葡萄球菌肽聚糖抗原具有良好的特异性。

7.根据权利要求1所述的制备的肽聚糖单克隆抗体3F8的广谱性强，其特征为：对金黄色葡萄球菌、沙克乳杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌和干酪乳杆菌的革兰氏阳性菌来源的肽聚糖交叉反应率高，特异性强，对革兰氏阳性菌肽聚糖具有广谱性。

8.根据权利要求1所述的制备成的试剂盒用来检测血清中革兰氏阳性菌的肽聚糖，其血清必须经过预处理才能用于检测，其特征为：将血清、4％EDTA处理液和超纯水以1∶1∶3的比例混匀后，沸水浴15min，10000rpm离心10min，上清液可用于检测。

9.如权利要求1所述的使用3F8和酶标二抗(羊抗鼠)来制备革兰氏阳性菌肽聚糖检测试剂盒，应用于临床诊断领域，并采用半定量法。