[发明专利]用抗重组人ZP4N和ZP4C多抗鉴定的人卵透明带蛋白-4表位最小基序肽

说明书

技术领域

本发明属于生物工程和免疫学技术领域，具体涉及包绕人卵子外一层由四个组成蛋白形成的透明带（zona pellcida，ZP）-4蛋白 (ZP4)表位最小基序肽及其扩展短肽和应用。

背景技术

相比减毒或灭活全病毒/寄生物疫苗和第二代亚单位疫苗，由于化学合成肽疫苗具有抗原易于恒定制备、易于保藏运输和副作用可明显降低（去除了蛋白抗原中可能致病的肽段）等优点，因此从上世纪70年代起就曾寄希望其能成为疫苗发展史上第三个里程碑。但受线性B细胞表位（B cell epitope，也称抗原决定簇antigenic determinant。以下简称表位）鉴定数的限制，至今都未成功研制出能被批准人临床应用的治疗性或预防性的合成肽疫苗。显然，合成肽疫苗的未来发展趋势应该是研制组合靶抗原上尽可能多的表位，包括选用有可能组合多个表位的生物合成肽法替代肽合成长度有限制的化学合成肽法。事实上已有这方面利用昆虫细胞和原核生物表达系统的抗疟原虫和抗肿瘤生物合成肽疫苗研制实践（Shi YP, Hasnain SE, Sacci JB, et al. Immunogenicity and in vitro protective efficacy of a recombinant multistage Plasmodium falciparum candidate vaccine. Proc Natl Acad Sci USA 1999; 96: 1615- 1620; Shi YP, Das P, Holloway B, et al. Development, expression, and murine testing of a multistage Plasmodium falciparum malaria vaccine candidate. Vaccine 2000; 18, 2902-2914; He YP, Xu WX, Hong AZ, et al. Immunogenic comparison for two different recombinant chimeric peptides (CP12 and CP22) containing one or two copies of three linear B cell epitopes from ?-hCG subunit. J Biotech 2010; 151: 15-21）。无需赘言，今后合成肽疫苗研制能否获得成功，其一突破无疑就是有赖于靶抗原上全部或接近全部表位的鉴定，以便为重组多表位肽疫苗的分子设计和生物制备提供尽可能多的候选表位（抗病毒治疗性疫苗还需同时组合细胞毒性T细胞表位）。