[发明专利]从紫花碎米荠中提取的黄酮苷及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药，特别是一种从紫花碎米荠中提取的黄酮苷及其制备方法。

背景技术

紫花碎米荠是碎米荠属(Cardamine)植物紫花碎米荠(Cardamine tangutorum)的干燥地上部分，分布于河北、山西、陕西、甘肃、青海、四川、云南等省。生于海拔2100-4400米的高山山沟草地及林下阴湿处。紫花碎米荠在民间以全草食用；亦供药用，其味辛，性温，具有清热利湿，平肝潜阳的功效，可用于治疗黄水疮；花治筋骨疼痛。

紫花碎米荠在我国分布广泛，资源十分丰富，并且具有显著和多样的临床作用和药理活性。紫花碎米荠为何具有药用价值，其活性成分如何提取，至今未见有公开报导。

发明内容

针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种从紫花碎米荠中提取的黄酮苷及其制备方法，可有效解决从紫花碎米荠中提取黄酮苷，并通过采用MTT法检测该化合物对Con A刺激后的脾淋巴细胞和胸腺淋巴细胞增殖的影响，以观察该化合物的免疫调节作用，为进一步的研究奠定基础的问题。

本发明解决的技术方案是，该提取的黄酮苷为山柰酚-3-O-[2″-O-β-D-吡喃葡萄糖基-6″-O-(2″″-O-阿魏酰基-β-D-葡萄糖基)]-β-D-吡喃葡萄糖苷，分子式是C₄₃H₄₈O₂₄，结构式如图1所示；

其比旋光度为[α]D²⁰-17(c,0.12,MeOH)，其制备方法是：将干燥紫花碎米荠地上部分，室温（15-25℃）下在闪式提取器中用紫花碎米荠重量10-12倍的体积浓度为50%丙酮组织破碎提取三次，每次15-20分钟，合并提取液，于45℃减压回收溶剂，真空干燥后得到干粉，干粉用水溶解，离心，上清液上大孔吸附树脂（Diaion HP-20）柱，用水冲柱至洗脱液流出无色、用体积浓度10%甲醇冲柱至洗脱液流出无色、用体积浓度20%甲醇冲柱至洗脱液流出无色、最后用体积浓度30%甲醇冲柱至洗脱液流出无色，收集30%甲醇洗脱液，减压回收溶剂，真空干燥后得到干粉，用水充分溶解，离心，上清液上凝胶（Toyopearl HW-40C）柱，用水冲柱，经薄层色谱检识合并含有目标成分的流份，得到组分A，组分A依次通过凝胶ToyopearlHW-40C柱、凝胶Sephadex LH-20柱、硅胶柱、MCI Gel CHP-20柱，反复分离纯化，得到黄色固体，然后，采用MTT法检测该化合物对Con A刺激后的脾淋巴细胞和胸腺淋巴细胞增殖活性的影响，发现具有较强的促增殖作用。

本发明是一种从紫花碎米荠中提取的化合物，具有免疫调节作用，其制备方法新颖独特，先进、科学，操作方便，经对河南、河北、山西的紫花碎米荠样品按上述方法经反复应用制备，并通过MTT法检测促增殖活性，均取得了相同或相近似的结果，表明本发明可靠性强，有效解决了对各地从紫花碎米荠中提取山柰酚-3-O-[2″-O-β-D-吡喃葡萄糖基-6″-O-(2″″-O-阿魏酰基-β-D-葡萄糖基)]-β-D-吡喃葡萄糖苷，为紫花碎米荠的应用提供了有利的技术手段和药用价值，经济和社会效益巨大。

附图说明

图1为山柰酚-3-O-[2″-O-β-D-吡喃葡萄糖基-6″-O-(2″″-O-阿魏酰基-β-D-葡萄糖基)]-β-D-吡喃葡萄糖苷的结构图。

图2为山柰酚-3-O-[2″-O-β-D-吡喃葡萄糖基-6″-O-(2″″-O-阿魏酰基-β-D-葡萄糖基)]-β-D-吡喃葡萄糖苷的主要HMBC相关图。

图3为山柰酚-3-O-[2″-O-β-D-吡喃葡萄糖基-6″-O-(2″″-O-阿魏酰基-β-D-葡萄糖基)]-β-D-吡喃葡萄糖苷的¹H-NMR图谱。

图4为山柰酚-3-O-[2″-O-β-D-吡喃葡萄糖基-6″-O-(2″″-O-阿魏酰基-β-D-葡萄糖基)]-β-D-吡喃葡萄糖苷的¹³C-NMR图谱。

图5为山柰酚-3-O-[2″-O-β-D-吡喃葡萄糖基-6″-O-(2″″-O-阿魏酰基-β-D-葡萄糖基)]-β-D-吡喃葡萄糖苷的HSQC图谱。

图6为山柰酚-3-O-[2″-O-β-D-吡喃葡萄糖基-6″-O-(2″″-O-阿魏酰基-β-D-葡萄糖基)]-β-D-吡喃葡萄糖苷的HMBC图谱。