[发明专利]一种海参微生态水质调节剂及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及水产养殖技术及微生物技术领域，特别涉及一种复合微生态水质调节剂的制备。

背景技术

近年来，刺参养殖已成为中国水产养殖业的支柱产业之一，但随着刺参现代集约化和规模化养殖迅速的发展，出现了一些严重问题，制约了其产业的发展，比如在养殖的过程中投喂大量高蛋白的饵料，很多未摄食的残饵、粪便排泄物和生物死体在水体中，分解生成很多的有害物质，恶化了水质，病原菌大量繁殖，致使海参产生强烈的应激反应，出现了摇头、身体收缩僵直、排脏、口肿、体表溃疡等现象，最后大面积体壁腐烂而死。人们通常采用抗生素、化学合成药物等防治刺参的疾病，但长期、大量使用抗生素不仅导致了刺参对病原微生物的易感性以及细菌耐药性，引起过敏等不良反应，并且造成整个生态环境的污染，严重影响了节约减排和食品安全，阻碍了无公害刺参养殖业的发展。

水产微生态制剂，是利用水产动物体内或养殖水体中的有益微生物经特殊加工工艺而形成的活菌制剂。水产微生态制剂具有氧化、氨化、硝化、反硝化、解磷、硫化及固氮等作用，可以使有害物质分解为小分子有机物(氨基酸、低级脂肪酸、单糖、环烃等)，最终分解为二氧化碳、硝酸盐、硫酸盐等，有效地降低水中的COD、氨氮、亚硝酸氮和硫化物的浓度，从而有效地改善水质。目前，应用于水产养殖的微生态水质调节剂，只限于一种或两种益生菌净化养殖水体，对养殖水体的净化效果不明显。海参的养殖水体中由于存有大量的残饵和排泄物，会产生很多复杂的有害物质，如氨、硫化氢、有机酸等，需要多种益生菌对不同的有害物质达到同时一次净化的效果。

本发明本着来源于自然，回归自然的原则，筛选与原宿主、原微生态系、原微生物种群相适应的菌种，选用从刺参养殖海水中筛选获得的高效蛋白酶产生菌、亚硝化细菌和反硝化细菌，旨在经过合理配伍研制一种专门针对净化刺参养殖海水的微生态制剂，主要是利用复合微生物的高浓度、高活性以及微生物之间的各类共代谢作用来降解养殖水体中的毒性及有机物，即利用蛋白酶产生菌分泌的蛋白酶将养殖废水中的可溶性蛋白分解成氨基酸，由亚硝化细菌和反硝化细菌的联合作用，将氨氮转化为无毒无害的气态氮从水中逸出。本发明的复合微生态制剂可以在发酵合成的状态下共存、共荣、共生、共养，使微生物群体朝着有益的方向发展成为一种具有活性的复合微生物。这些众多的微生物在应用环境中相互联合，在发生基质变迁的同时，构成新的生态学，重新建立生存关系，从而形成共同发挥作用的体系。

发明内容

为了克服现有技术中养殖水质污染严重、病害频繁发生、养殖海参死亡率高、海参体内化学残留超标，而发明一种海参养殖水体修复的微生态水质调节剂。针对海参的生理习性和养殖特点，应用现代生物技术，由海参养殖环境中分离筛选的芽孢杆菌所组成的复合益生菌，形成一个菌群共生增殖、功能齐全、结构稳定的微生态水质调节剂。该微生态水质调节剂主要由芽孢杆菌、异养硝化细菌混合组成，由海参养殖环境中分离并筛选的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)YB-1CGMCC No.5116、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)YB-2CGMCCNo.5117和弯曲芽孢杆菌(Bacillus flexus)XH-1CGMCC No.5115，以玉米粉和豆饼粉为主要培养料，以沸石和麦麸作为吸附载体，加工成固体粉剂。本发明中涉及的微生态制剂，于2011年08月05号送到中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏(中国科学院微生物研究所，邮编100101)，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

本发明的主要方面是：一种海参微生态水质调节剂的制备方法，包括以下操作步骤：

①制备益生菌的种子液

将枯草芽孢杆菌YB-1CGMCC No.5116的菌悬液、蜡状芽孢杆菌YB-2CGMCC No.5117的菌悬液和弯曲芽孢杆菌XH-1CGMCC No.5115的菌悬液，以1∶1∶1的菌数比例混合后，再按发酵液体积的3％接种，搅拌均匀，并于25-40℃发酵24-48h，制备益生菌种子液；

其中，上述三种益生菌菌悬液的制备方法是本领域技术人员的常规技术，即：将在LB琼脂斜面培养基上生长良好的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)YB-1CGMCC No.5116、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)YB-2CGMCC No.5117和弯曲芽孢杆菌(Bacillus flexus)XH-1CGMCCNo.5115，分别加入水后，分别制成一定浓度的菌悬液；

②液态发酵