[发明专利]用于华法林个体化用药相关基因SNP位点检测的试剂盒及其PCR扩增方法无效
| 申请号： | 201210078383.5 | 申请日： | 2010-07-23 |
| 公开（公告）号： | CN102719524A | 公开（公告）日： | 2012-10-10 |
| 发明（设计）人： | 秦正红;王进;缪丽燕;刘二平 | 申请（专利权）人： | 苏州大学;苏州旷远生物分子技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人： | 马明渡;王华 |
| 地址： | 215123 江苏省苏州市工*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 华法林 个体化 用药 相关 基因 snp 检测 试剂盒 及其 pcr 扩增 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种用于华法林个体化用药相关基因SNP位点检测的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括检测基因CYP2C9SNP位点的两个正向引物以及一个反向引物；所述检测基因CYP2C9SNP位点的两个正向引物以及一个反向引物的碱基序列如下所示：
正向引物：5’-TGCACGAGGTCCAGAGATACAT-3’；
5’-TGCACGAGGTCCAGAGATACCT-3’；
反向引物：5’-ACTGGAAACAAGAGAAAGTCCA-3’；
其中，所述正向引物的3’端-1，-2，-3位碱基之间硫代磷酸化修饰。
2.一种采用权利要求1所述的检测华法林个体化用药相关基因的试剂盒PCR扩增方法，其特征在于：
预变性的条件为：温度为95℃，时间为5分钟；
PCR扩增由第一阶段和第二阶段构成：
第一阶段由15次扩增循环构成，其条件为：
变性：温度为95℃，时间为30秒；
退火：起始温度为68℃，每一次扩增循环温度递减1℃，直至扩增循环结束，时间为30秒；
延伸：温度为72℃，时间为30秒；
第二阶段由25次扩增循环构成，其条件为：
变性：温度为95℃，时间为30秒；
退火：温度为58℃，时间为30秒；
延伸：温度为72℃，时间为30秒；
终延伸的条件为：温度为72℃，时间为10分钟。
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