[发明专利]地沟油快速检测方法

说明书

技术领域

本发明属于地沟油检测技术领域，具体涉及一种地沟油快速检测方法。

背景技术

现有的各种地沟油检测方法主要有常规油脂理化指标法(参见潘剑宇，尹平河，余汉豪.2003.潲水油、煎炸老油与合格食用植物油的鉴别研究.食品科学24：27-29以及张漩，余汉豪，单习章.2004.餐饮业废油脂有害成分及特征指标研究.广州环境科学19：29-31.)、胆固醇含量判定法(张蕊，祖丽亚，樊铁.2006.测定胆固醇含量鉴别地沟油的研究.中国油脂31：65-67)、薄层色谱检测极性物法(尹平河，潘剑宇，赵玲.2004.薄层色谱法快速鉴别潲水油和煎炸老油的研究.食品科学29：47-49)、电导率法(朱锐，王睿，王小京.2008.电导率测定在鉴别食用植物油掺伪应用研究.粮食与油脂11：42-43)、顶空-气相色谱联用质谱检测油脂的挥发性成分(全常春，尹平河.2004.精炼餐饮业地沟油挥发性危害成分的GC/MS静态顶空分析.食品科学25：128-134)、脂肪酸相对不饱和度(兰庆丰，梁敏.2006.气相色谱法鉴别掺假食用油的研究.刑事技术1：37-39)、测真菌毒素法(黄军，熊华，李亮.2008.潲水油在精炼中卫生指标的检测与分析.中国油脂33：70-74)、表面活性剂残留法(曹文明，薛斌，杨波涛，丁丹华，孙禧华.2011.地沟油检测技术的发展与研究.粮食科技与经济36：42-44以及张清，沈群.2010.我国食用植物油中地沟油检测技术回顾.食品科技35：311-314)等。方法考察的对象多为地沟油中的特征化学成分，涉及的技术手段也主要为分析化学方法如荧光光谱、气相色谱、原子吸收光谱等。

现有的各种检测方法都存在或特征指标专一性不强，或检测灵敏度不高，或检测准确性不高，仅能在一定范围内适用特定类型的地沟油的检测判定的特点。由于地沟油不是一种化学组分固定不变的物质，因来源不同、精炼加工程度不同，其内在物质组成会呈现或多或少的差异。因此，包括以上列举的现有检测技术，都未能针对地沟油独有的特征指标及其量值来进行检测判断，检测结果的判定不能适用所有类型的地沟油(曹文明，薛斌，杨波涛，丁丹华，孙禧华.2011.地沟油检测技术的发展与研究.粮食科技与经济36：42-44)。用分析化学的方法去测定地沟油中有害残留的成分，容易出现漏检和对不同有害成分检测灵敏度不够的情况。地沟油成分的复杂性，又导致了无法根据分析化学所测定的各项指标而制定一个统一的，切实可行的地沟油检测标准。换句话说，要根据有害物质残留量来制定地沟油标准是极其困难的，甚至是不可能的。因此，要解决地沟油检测这一技术问题，必须另辟蹊径。

发明内容

本发明目的在于提供一种地沟油快速检测方法，解决了现有技术中地沟油检测方法中以特定的化学组分为目标化合物为检测目标导致检测方法只能在一定范围内适用特定类型的地沟油的缺陷。

为了解决现有技术中的这些问题，本发明提供的技术方案是：

一种地沟油快速检测方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：

(1)按照常规细胞培养方法在培养基中进行正常细胞的培养，当正常细胞达到预定数量时加入待测地沟油样品继续培养；

(2)对培养后的细胞死亡或存活情况进行统计或对细胞毒性进行检测，根据培养后的细胞毒性或细胞死亡或存活情况判断待测地沟油样品是否为地沟油。

优选的，所述方法步骤(1)待测地沟油样品在加入培养基前进行过滤处理。

优选的，所述方法步骤(1)中常规细胞培养方法培养正常细胞的时间控制在1～36小时。

优选的，所述方法步骤(1)中加入的待测地沟油样品的体积为0.1mL。

优选的，所述方法步骤(1)中加入待测地沟油样品继续培养的时间控制在24～48小时。

优选的，所述方法步骤(2)中细胞死亡情况统计是采用考马斯亮蓝染色、活/死细胞染色方法处理继续培养的细胞后，通过检测蓝染的细胞数量进行死亡细胞统计。

优选的，所述方法还包括在步骤(1)进行正常细胞的培养后加入常用食用油进行继续培养，以常用食用油为对照，通过检测常用食用油与待测地沟油样品进行对比检测。

优选的，所述方法步骤(2)中判断待测地沟油样品是否为地沟油是通过先分别采用地沟油与常用食用油处理细胞培养后的细胞存活或死亡情况进行对比统计，获得常用食用油与地沟油间的阈值；根据待测地沟油样品处理细胞培养后的细胞存活或死亡情况与阈值的比较判断待测地沟油样品是否为地沟油。

优选的，所述方法步骤(2)中设置若干个阈值将地沟油分为低度毒性地沟油、中度毒性地沟油和高度毒性地沟油。