[发明专利]一种脂肪酶及其编码基因与应用

权利要求书

1.一种蛋白，是如下(a)或(b)或(c)的蛋白质：

(a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)序列表中序列2的自N末端第21-408位氨基酸序列组成的蛋白质；

(c)将序列表中序列2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有脂肪酶功能的由(a)或(b)衍生的蛋白质。

2.权利要求1所述蛋白的编码基因。

3.根据权利要求2所述的编码基因，其特征在于：所述编码基因为如下1)-4)中任一所述的DNA分子：

1)序列表中的序列1所示的DNA分子；

2)序列表中的序列1自5’末端第61-1224位核苷酸所示的DNA分子；

3)在严格条件下可与1)或2)限定的DNA序列杂交且编码具有脂肪酶功能所述蛋白的DNA分子；

4)与1)或2)限定的DNA序列具有90％以上的同源性且编码具有脂肪酶功能所述蛋白的DNA分子。

4.含有权利要求2或3所述编码基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。

5.根据权利要求4所述的重组载体，其特征在于：所述重组载体为在pET-28载体中插入权利要求1所述蛋白的编码基因得到的重组载体。

6.根据权利要求4所述的重组菌，其特征在于：所述重组菌是将权利要求4所述的重组载体导入到大肠杆菌中得到的重组菌。

7.一种引物对，由序列表中的序列3所示的引物1和序列表中的序列4所示的引物2组成。

8.权利要求1所述的蛋白作为脂肪酶的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述脂肪酶具有如下1)-6)中至少一种性质：

1)耐受有机溶剂，所述有机溶剂进一步具体为甲醇、乙醇、甘油或正庚烷；

2)耐受去污剂，所述去污剂进一步具体为吐温20、吐温40、吐温80或曲拉通100；

3)耐受金属离子，所述金属离子进一步具体为Na⁺、K⁺、Li、Co²⁺或Cr³⁺；

4)耐受SDS；

5)耐受β巯基乙醇；

6)耐受蛋白酶；所述蛋白酶进一步具体为胰蛋白酶、α-糜蛋白酶、蛋白酶K、枯草杆菌蛋白酶A或胃蛋白酶。

10.一种制备脂肪酶的方法，包括如下步骤：发酵权利要求4或6所述的重组菌，即得到脂肪酶；

所述脂肪酶具体具有如下1)-6)中至少一种性质：

1)耐受有机溶剂，所述有机溶剂进一步具体为甲醇、乙醇、甘油或正庚烷；

2)耐受去污剂，所述去污剂进一步具体为吐温20、吐温40、吐温80或曲拉通100；

3)耐受金属离子，所述金属离子进一步具体为Na⁺、K⁺、Li、Co²⁺或Cr³⁺；

4)耐受SDS；

5)耐受β巯基乙醇；

6)耐受蛋白酶；所述蛋白酶进一步具体为胰蛋白酶、α-糜蛋白酶、蛋白酶K、枯草杆菌蛋白酶A或胃蛋白酶。