[发明专利]一种利用固定化酵母细胞制备栀子蓝色素的方法

权利要求书

1.一种利用固定化酵母细胞制备栀子蓝色素的方法，其特征在于包括如下步骤：

a） 将产β-葡萄糖苷酶的酵母菌株按总重量3%-7%接种于培养基上发酵得到菌液，菌液经离心后，取下层菌液用海藻酸钠溶液进行包埋，形成海藻酸钠-酵母菌悬液，将海藻酸钠-酵母菌悬液逐滴滴入到氯化钙溶液中形成固定化酵母细胞;

b）将栀子苷溶液、氨基酸溶液以及固定化酵母细胞搅拌混合，得到栀子蓝溶液；

将栀子蓝溶液加入到由大孔弱碱性苯乙烯系阴离子交换树脂组成的柱中，用乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，将洗脱液浓缩，浓缩液经喷雾干燥得到栀子蓝粉末。

2.根据权利要求1所述的利用固定化酵母细胞制备栀子蓝色素的方法，其特征在于步骤a）中将海藻酸钠-酵母菌悬液逐滴滴入到1 -4mol/L氯化钙溶液中固化，形成直径为1-2mm的固定化小球，固化温度为20—37℃，固化时间为10-18h；将固定化小球置于0.01-0.1mol/L的氯化钙溶液中硬化形成固定化酵母细胞，硬化时间为1-5h。

3.根据权利要求1所述的利用固定化酵母细胞制备栀子蓝色素的方法，其特征在于b)步骤中加入醋酸缓冲液调节PH至3-6，反应温度为40-50℃，搅拌速度为100-200r/min，搅拌时间为3-8h。

4.根据权利要求1或2或3所述所述的利用固定化酵母细胞制备栀子蓝色素的方法，其特征在于b)步骤中栀子苷溶液与氨基酸溶液等体积混合后，取混合液与固定化酵母细胞以质量比4:1的比例搅拌混合。

5.根据权利要求4所述的利用固定化酵母细胞制备栀子蓝色素的方法，其特征在于步骤a）中的培养基为YPDL液体培养基，发酵温度为28℃、发酵时间为72小时。

6.根据权利要求5所述的利用固定化酵母细胞制备栀子蓝色素的方法，其特征在于b)步骤中栀子苷溶液的质量浓度为5%-10%、氨基酸溶液的质量浓度为3%-7% 。

7.根据权利要求1所述的利用固定化酵母细胞制备栀子蓝色素的方法，其特征在于步骤b)中栀子苷溶液所采用的栀子苷的制备方法如下：

a）取栀子粉末，加入其质量10-50倍的水溶解，制备成栀子溶液；

b）将栀子溶液过滤后，将滤液加入到由聚苯乙烯型非极性大孔吸附树脂组成的柱中，用体积浓度为20—30%的乙醇洗脱，将洗脱液浓缩、冷冻干燥后得到栀子苷制品。

8.根据权利要求1所述的利用固定化酵母细胞制备栀子蓝色素的方法，其特征在于所述海藻酸钠溶液的质量浓度为2%-6% 。

9.根据权利要求1所述的利用固定化酵母细胞制备栀子蓝色素的方法，其特征在于步骤c）中的乙醇溶液的体积浓度为50%-70%。

10.根据权利要求1或5所述的利用固定化酵母细胞制备栀子蓝色素的方法，其特征在于所述氨基酸选自甘氨酸、精氨酸、谷氨酸钠、苯丙氨酸、苏氨酸、亮氨酸、谷氨酸钠中的一种。