[发明专利]阿苯达唑–2–氨基砜残留检测单克隆抗体及制备方法和应用

权利要求书

1.一种能识别阿苯达唑-2-氨基砜的单克隆抗体，其特征在于，杂交瘤细胞GA/2A11，CCTCC，NO：C201142。

2.权利要求1所述的一种能识别阿苯达唑残留标示物阿苯达唑-2-氨基砜的单克隆抗体的制备方法，其步骤是：

(1)将半抗原阿苯达唑-2-氨基砜与牛血清白蛋白偶联得到免疫原；

(2)将半抗原阿苯达唑-2-氨基砜与卵清蛋白偶联得到包被原；

(3)利用步骤(1)的免疫原制备得到杂交瘤细胞株GA/2A11所分泌的单克隆抗体；

(4)用步骤(2)的包被原包被固相载体；

(5)将待测样品用乙酸乙酯在氢氧化钾或碳酸钠溶液等碱化条件下提取、氮气吹干、正己烷净化和样品稀释液重新溶解得到待测物；

(6)对步骤(5)的待测物进行酶联免疫检测；

步骤(5)样品稀释液的组分及配比为：NaCl 8.00g，KH₂PO4 0.20g，Na₂HPO4·12H₂O 2.90g，KCl 0.20g，加双蒸水定容至1000mL。

3.权利要求1所述的一种能识别阿苯达唑残留标示物阿苯达唑-2-氨基砜的单克隆抗体的试剂盒，该试剂盒包括：

(1)包被有包被原ABZSO₂NH₂-GA-OVA的酶标板；

(2)ABZSO₂NH₂标准品溶液6瓶，浓度分别为0、20、40、80、160、320μg/L；

(3)GA/2A11细胞株单克隆抗体工作液；

(4)辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG抗体工作液；

(5)浓缩磷酸盐缓冲液：NaCl 80.00g，KH₂PO₄ 2.00g，Na₂HPO₄·12H₂O 29.00g，KCl 2.00g，加双蒸水至1000mL；

(6)浓缩洗涤液：NaCl 80.00g，KH2PO4 2.00g，Na₂HPO₄·12H₂O 29.00g，KCl 2.00g，Tween205mL，加双蒸水至1000mL；

(7)底物混合液：准确吸取底物B液10mL，加入100μL底物A液，混匀；

(9)终止液：2mol/L硫酸溶液。

4.根据权利要求3所述的一种能识别阿苯达唑残留标示物阿苯达唑-2-氨基砜的试剂盒，其特征在于：所述的一种酶标板的制备方法，其步骤是：

(1)包被：用碳酸盐缓冲液将ABZSO₂NH₂-GA-OVA稀释成0.25μg/mL包被原溶液，吸取100μL包被原溶液于各酶标孔，水平放置于湿盒，4℃孵育12h；

(2)洗板：甩出酶标板内包被原溶液，拍干，吸取250μL洗涤液于各酶标孔，静置30s后，甩出洗涤液，在吸水纸上拍干；重复洗涤3次；

(3)封闭：吸取250μL封闭液于各酶标孔，水平置于湿盒内，37℃培养箱孵育2h；

(4)洗板：甩出封闭液，吸取250μL洗涤液于各酶标孔，静置30s后，甩出洗涤液，在吸水纸上拍干；重复洗涤3次；

(5)烘干：在吸水纸上拍干后；将酶标板于37℃培养箱中倒置烘干0.5h；

(6)封装：酶标板烘干后和干燥剂一起装入铝箔袋，用真空封装机封装。

5.权利要求1所述的一种能识别阿苯达唑残留标示物阿苯达唑-2-氨基砜的试剂盒在检测动物可食性组织中阿苯达唑-2-氨基砜残留中的应用。