[发明专利]一种胶原蛋白低聚肽的制备方法无效
申请号: | 201210034286.6 | 申请日: | 2012-02-15 |
公开(公告)号: | CN102559826A | 公开(公告)日: | 2012-07-11 |
发明(设计)人: | 胡如桂;于雪源 | 申请(专利权)人: | 胡如桂 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/34;C07K2/00 |
代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 陈慧珍 |
地址: | 100070 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 胶原 蛋白 低聚肽 制备 方法 | ||
1.一种胶原蛋白低聚肽的制备方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
(1)将干净的动物皮加水并加酸浸泡;
(2)将步骤(1)得到的动物皮清洗至中性,加水并加表面活性剂浸泡;
(3)将步骤(2)得到的动物皮清洗至中性,沥干水分,加水,然后加酶进行酶解,得到水解液;
(4)将上述水解液中加入活性炭进行活性炭吸附;
(5)将步骤(4)得到的溶液离心,取上层清液,通过微孔滤膜过滤;
(6)将步骤(5)过滤得到的透过液先通过超滤膜处理,再通过纳滤膜进行纳滤处理,然后浓缩;
(7)将步骤(6)得到的浓缩液进行干燥,得到胶原蛋白低聚肽。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述动物皮选自鱼皮、猪皮、驴皮、牛皮、马皮、绵羊皮、山羊皮、袋鼠皮、腹鼠皮和无尾熊皮中的一种或者至少两种的组合,优选鱼皮、猪皮、驴皮、牛皮中的一种或者至少两种的组合;
优选地,当所述动物选自猪皮、驴皮、牛皮中的一种或者至少两种的组合时,动物皮需刮脂或/和脱毛;
优选地,所述动物皮为新鲜动物皮或/和干的动物皮,优选新鲜动物皮;
优选地,所述干净的动物皮通过清洗的方式得到;
优选地,步骤(1)中将动物皮切成小块;
优选地,所述小块的长优选1~3cm,宽优选1~3cm;
优选地,步骤(1)中加入动物皮重2~20倍的水,优选3~15倍,进一步优选5~10倍;
优选地,步骤(1)中所述水选自蒸馏水、去离子水、高纯水、超纯水中的一种或者至少两种的组合,优选去离子水;
优选地,步骤(1)中所述酸选自盐酸、醋酸、柠檬酸、乳酸、丙酮酸、甲酸中的一种或者至少两种的混合物,优选盐酸、醋酸、柠檬酸、乳酸中的一种或者至少两种的混合物。
3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于,步骤(1)中加酸调节pH值为0.2~5,优选0.3~4.5,进一步优选0.5~4;
优选地,步骤(1)中所述浸泡在搅拌条件下进行;
优选地,步骤(1)中所述浸泡在室温下进行;
优选地,步骤(1)中所述浸泡时间为1~10h,优选2~8h,进一步优选3~5h;
优选地,步骤(2)中加入动物皮重2~20倍的水,优选3~15倍,进一步优选5~10倍;
优选地,步骤(2)中所述水选自蒸馏水、去离子水、高纯水、超纯水中的一种或者至少两种的组合,优选去离子水。
4.如权利要求1-3之一所述的方法,其特征在于,步骤(2)中加入动物皮重0.005~2%的表面活性剂,优选0.01~1.5%,进一步优选0.01~1%;
优选地,步骤(2)中所述表面活性剂选自非离子型表面活性剂和/或阴离子表面活性剂,优选脂肪醇聚氧乙烯醚、十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠中的一种或者至少两种的混合物;
优选地,步骤(2)中所述浸泡在20~50℃温度下进行,优选25~45℃,进一步优选30~35℃;浸泡时间为1~20h,优选1.5~15h,进一步优选2~10h;
优选地,步骤(2)中所述浸泡在搅拌条件下进行;
优选地,步骤(3)加水至底物的质量分数为10~50%,优选15~40%,进一步优选20~30%;
优选地,所述水选自蒸馏水、去离子水、高纯水、超纯水中的一种或者至少两种的组合,优选去离子水。
5.如权利要求1-4之一所述的方法,其特征在于,步骤(3)中加入动物皮重0.05~10%的酶,优选0.1~8%,进一步优选0.1~5%;
优选地,步骤(3)中所述酶选自中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、金属基质蛋白酶、胰蛋白酶、微生物蛋白酶、动物蛋白复合水解酶、酸性蛋白酶、菠萝蛋白酶中的一种或者至少两种的混合物,进一步优选中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、金属基质蛋白酶中的一种或者至少两种的混合物;
优选地,步骤(3)中所述酶解的温度为30~80℃,优选40~70℃,进一步优选45~65℃;
优选地,步骤(3)中所述酶解的时间为0.5~8h,进一步优选0.8~6h,进一步优选1~5h。
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