[发明专利]一种高特异性聋病易感基因检测试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种高特异性聋病易感基因检测试剂盒，其特征在于包括DNA聚合酶及其缓冲溶液、扩增各易感基因及Amelogenin基因座的引物、内标及各基因突变位点对应的基因分型标准物，所述聋病易感基因为GJB2：176del16bp、235delC、299delAT；SLC26A4：2168A＞G、IVS7-2A＞G、1174A＞T、1226G＞A、1975G＞C、2027T＞A；12SrDNA：1494C＞T、1555A＞G；GJB3：538C＞T。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：

用于GJB2 235delC、176del16bp、299delAT检测的引物为：

SEQ NO.1：5’-CGCATTATGATCCTCGTTGTGG-3’

SEQ NO.2：5’-GCTTGATGAACTTCCTCTTCTTCTC-3’；

用于12S rRNA 1555A＞G突变检测的引物为：

SEQ NO.3：5’-AGTGGGTTTGGGGCTAGGTTTAG-3’

SEQ NO.4：5’-GTACGCATTTATATAGAGTAGC-3’；

用于12S rRNA 1494C＞T突变检测的引物为：

SEQ NO.5：5’-AGTGGGTTTGGGGCTAGGTTTA-3’

SEQ NO.6：5’-GACACACCGCCCGTCTCT-3’；

用于IVS7-2A＞G检测的引物为：

SEQ NO.7：5’-CCAGCATTGTAATTTTTTTCCAGG-3’

SEQ NO.8：5’-GTTTTTAACATCTTTTGTTTTATTTAG-3’；

用于SLC26A4：2168A＞G突变检测的引物为：

SEQ NO.9：5’-TGTGATAGAAAAGCTGGAGCAAT-3’

SEQ NO.10：5’-TTCTGTAGATAGAGTATAGCATCAC-3’；

用于SLC26A4：1174A＞T突变检测的引物为：

SEQ NO.11：5’-AATGTACTTCCTGAAATACTCAGCGAA-3’

SEQ NO.12：5’-ATGTACTTCCTGAAATACTCAGCGAA-3’；

用于SLC26A4：1226G＞A突变检测的引物为：

SEQ NO.13：5’-AATGTACTTCCTGAAATACTCAGCGA-3’

SEQ NO.14：5’-GTATCTCCTGGACGGCCGTGT-3’；

用于SLC26A4：1975G＞C突变检测的引物为：

SEQ NO.15：5’-AGATCTGGAGGAACTTGATATCCCAA-3’

SEQ NO.16：5’-GAAAGATATAGCTCCACAGTCAAGCAG-3’；

用于SLC26A4：2027T＞A突变检测的引物为：

SEQ NO.17：5’-AGATCTGGAGGAACTTGATATCCC-3’

SEQ NO.18：5’-GCAGAACCTTACCACCCGCT-3’；

用于GJB3：538C＞T突变检测的引物为：

SEQ NO.19：5’-CGAGGCTTGTCCTTGTGCA-3’

SEQ NO.20：5’-GTGGACTGCTACATTGCCT-3’；

其中LNA核苷以黑体字表示。

用于Amelogenin基因座检测的引物为：

SEQ NO.21：5’-CCCTGGGCTCTGTAAAGAAT-3’

SEQ NO.22：5’-GCAGAGCTTAAACTGGGAAGC-3’。

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于：所述的用于GJB2：176del16bp、235delC、299delAT；SLC26A4：2168A＞G、IVS7-2A＞G、1174A＞T、1226G＞A、1975G＞C、2027T＞A；12SrDNA：1494C＞T、1555A＞G；GJB3：538C＞T及Amelogenin基因座扩增的引物，每对引物中有一条引物的5’端进行荧光染料标记。