[发明专利]利用幼穗拯救获得转基因小麦的方法有效

专利信息
申请号: 201210006728.6 申请日: 2012-01-11
公开(公告)号: CN103205455A 公开(公告)日: 2013-07-17
发明(设计)人: 李根英;夏先春;李玉莲;高洁;宋国琦;宋华东;何中虎;黄承彦;樊庆琦;隋新霞;楚秀生 申请(专利权)人: 山东省农业科学院作物研究所;中国农业科学院作物科学研究所
主分类号: C12N15/82 分类号: C12N15/82;A01H4/00;A01H5/00
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 关畅;任凤华
地址: 250100 山东*** 国省代码: 山东;37
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要:
搜索关键词: 利用 拯救 获得 转基因 小麦 方法
【权利要求书】:

1.培育转基因小麦的方法,包括通过农杆菌介导将目的DNA转入小麦细胞的步骤,其特征在于,所述方法包括如下步骤:

1)将含有目的DNA表达载体的重组农杆菌接种于胚芽鞘长为1.0mm-1.2mm的露白小麦种子的茎尖分生组织中,培养所述露白小麦种子获得处于雌雄蕊分化期的幼穗;

2)取步骤1)得到的处于雌雄蕊分化期的幼穗进行离体脱分化得到愈伤组织,保留含有所述目的DNA的愈伤组织,得到所述转基因小麦。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤1)中所述接种是在所述胚芽鞘长为1.0mm-1.2mm的露白小麦种子的茎尖分生组织中注入1μL所述含有目的DNA表达载体的重组农杆菌菌液。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:所述重组农杆菌菌液的OD600为0.6。

4.根据权利要求2或3所述的方法,其特征在于:所述重组农杆菌菌液中含有乙酰丁香酮0.4mmol/L。

5.根据权利要求1-4中任一所述的方法,其特征在于:所述农杆菌为根癌农杆菌。

6.根据权利要求1-5中任一所述的方法,其特征在于:步骤2)中所述离体脱分化按照包括如下步骤的方法进行:将所述处于雌雄蕊分化期的幼穗接种于脱分化培养基中培养,获得愈伤组织。

7.根据权利要求1-6中任一所述的方法,其特征在于:步骤2)中所述离体脱分化得到愈伤组织,保留含有所述目的DNA的愈伤组织后,还包括将所述含有所述目的DNA的愈伤组织接种于分化培养基中培养,获得具有根茎叶的小麦植株的步骤。

8.根据权利要求6或7所述的方法,其特征在于:所述脱分化培养基和所述分化培养基的基础培养基为MS培养基。

9.根据权利要求7或8所述的方法,其特征在于:所述分化培养基中培养的光照条件为:连续光照,所述连续光照的光照强度为1500LUX。

下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于山东省农业科学院作物研究所;中国农业科学院作物科学研究所,未经山东省农业科学院作物研究所;中国农业科学院作物科学研究所许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201210006728.6/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。

×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top