[发明专利]家蚕质型多角体病毒荧光定量PCR检测方法有效
| 申请号： | 201210004704.7 | 申请日： | 2012-01-10 |
| 公开（公告）号： | CN102559929A | 公开（公告）日： | 2012-07-11 |
| 发明（设计）人： | 吴萍;郭锡杰;李龙;陈涛 | 申请（专利权）人： | 江苏科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人： | 楼高潮 |
| 地址： | 212003*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 家蚕 质型多角体 病毒 荧光 定量 pcr 检测 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种家蚕质型多角体病毒荧光定量PCR检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)、以家蚕质型多角体蛋白基因的保守序列(SEQ ID No：1)为靶目标，设计特异性引物，扩增目的基因片断；
(2)、利用步骤(1)所得片断构建定量标准质粒；
(3)、提取样品RNA，反转录合成cDNA；
(4)、实时荧光定量PCR检测方法检测样本中的家蚕质型多角体病毒含量。
2.根据权利要求1所述的家蚕质型多角体病毒荧光定量PCR检测方法，其特征是，步骤(1)和步骤(4)中，扩增时所用引物为：
正向引物：5′ATACAAGGTTGGCATTTCAGA 3’，
反向引物：5′ACCGCCGTTAGGATAGTAGAT 3’。
3.根据权利要求1所述的家蚕质型多角体病毒荧光定量PCR检测方法，其特征是，步骤(2)中所述质粒使用的是pGEM-T Easy。
4.根据权利要求1所述的家蚕质型多角体病毒荧光定量PCR检测方法，其特征是，步骤(4)中，PCR反应体系为：95℃预变性3min；95℃ 15s，60℃ 1min，共40个循环。
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