[发明专利]使用含有载脂蛋白A-I及其突变体的重组高密度脂蛋白的雷帕霉素制剂

说明书

技术领域

本发明涉及包含重组高密度脂蛋白的雷帕霉素(rapamycin)制剂，所述重组高密度脂蛋白包含载脂蛋白A-I及其突变体V156K，以改善雷帕霉素的溶解度和医疗用途(如抑制老化和抑制动脉硬化)。

背景技术

雷帕霉素的分子量为913.6Da，是一种31元环的大环内酯类化合物，其化学式为C₅₁H₇₉NO₁₃。由于哌啶甲酸酯(pipecolate)酰胺键附近的空间位阻作用，雷帕霉素在溶液中以4∶1的比例形成结构上的反式异构体与顺式异构体(在氯仿溶液中)。雷帕霉素几乎不溶于水、脂肪烃和二乙醚，但溶于醇、卤代烃和二甲亚砜。在37℃的温度下，在血浆、低pH值和中性pH值的缓冲溶液中，处于溶液状态的雷帕霉素是不稳定的，并且以小于10小时的半衰期分解。

特别地，雷帕霉素具有多种生物活性，例如抗真菌活性、抗癌活性和免疫抑制活性；而且，雷帕霉素还被报道为寿命延长药物。此外，雷帕霉素被用作医疗装置(例如支架)的涂布剂。

然而，雷帕霉素具有低生物利用度和溶解度。为了克服该缺点，已合成了许多雷帕霉素衍生物：羧酸酯类(PCT WO92/05179)；氨基甲酸酯类(US5,118,678)；碳酸酯类(US5,260,300)；酰胺酯类(US5,118,678)；含氟酯类(US5,100,883)；缩醛(acetal)(US5,151,413)；硅醚类(silyl ethers)(US5,120,842)；二环衍生物(US5,120,725)；雷帕霉素二聚体(US5,120,727)；以及O-芳香基、O-烷基、O-烯基和O-炔基衍生物(US5,258,389)；以及多种雷帕霉素药物前体(US5,672,605、US5,583,139、US5,527,907、US5,457,111、US5,955,100、US6,146,658和US5,935,995)。

然而，基于提高雷帕霉素溶解度而对具有改善的生物利用度的药物所进行的开发仍然受到限制。因此，需要对改善雷帕霉素溶解度的药物进行开发。

发明内容

技术问题

本发明的发明人针对改善雷帕霉素的溶解度进行了研究，并发现通过使用重组高密度脂蛋白(含有载脂蛋白突变体V156K)包封雷帕霉素时，雷帕霉素的溶解度得以改善；并且其医疗用途(如抑制老化和抑制动脉硬化)得以改善，从而完成了本发明。

本发明提供了一种用于改善雷帕霉素溶解度及其医疗用途(如抑制老化和抑制动脉硬化)的新型雷帕霉素制剂，并提供了制备所述雷帕霉素制剂的方法。

技术方案

根据本发明实施方式所述的雷帕霉素制剂基于总重量为100重量份的重组高密度脂蛋白，包含0.1-10重量份的雷帕霉素，其中，所述重组高密度脂蛋白包含载脂蛋白突变体V156K，所述载脂蛋白突变体V156K由载脂蛋白(apoA-I)第156位的氨基酸被赖氨酸取代而制备。

有益效果

根据本发明的雷帕霉素制剂是通过使用重组高密度脂蛋白(包含载脂蛋白突变体V156K)包封雷帕霉素而制备的。由于该包封作用，具有低溶解度和生物利用度的雷帕霉素的溶解度得以改善，并且其老化抑制作用和动脉硬化抑制作用也得以改善。

附图说明

图1A显示了重组高密度脂蛋白在非变性(native)状态下的电泳结果；图1B显示了重组高密度脂蛋白粒子中apoA-I分子的数量。

图2显示了根据本发明实施方式所述的雷帕霉素制剂的还原作用。

图3是显示根据本发明实施方式所述的雷帕霉素制剂的LDL抗氧化作用的图。

图4显示了反映出根据本发明实施方式所述的雷帕霉素制剂的LDL抗氧化作用的琼脂糖电泳结果。

图5显示了根据本发明实施方式所述的雷帕霉素制剂的CETP抑制作用。

图6和图7显示了根据本发明实施方式所述的雷帕霉素制剂的抗老化作用。

具体实施方式

根据本发明实施方式所述的雷帕霉素制剂基于总重量为100重量份的重组高密度脂蛋白，包含0.1-10重量份的雷帕霉素，其中，所述重组高密度脂蛋白包含载脂蛋白突变体V156K，所述载脂蛋白突变体V156K由载脂蛋白(apoA-I)第156位的氨基酸被赖氨酸取代而制备。