[发明专利]黄芪中毛蕊异黄酮苷的提取与纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药材对照品制备方法，具体是一种黄芪中毛蕊异黄酮苷的提取与纯化方法。

技术背景

2008年我国首次把中药标准物质研究列入国家科技计划，建立我国中药材标准物质、中药材物质标准、中药材标准分析方法技术规范和国际上通行的中药标准是实现中药现代化的关键。黄芪作为非常中药的一味补气中药，具有益气固表、敛汗固脱、托疮生肌、利水消肿之功效。临床上应用非常广泛，主要用于治疗气虚乏力，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，痈疽难溃，久溃不敛，血虚萎黄，内热消渴，慢性肾炎，蛋白尿，糖尿病等病症。自2010版药典以来，有关黄芪药材的质量控制在原有对照品黄芪甲苷的基础上又引进黄芪毛蕊异黄酮苷作为质量控制的标准，但目前还没有此对照品制备方法的相关报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种高效率、低成本中药材对照品黄芪中毛蕊异黄酮苷的提取与纯化方法。

本发明以如下技术方案解决上述技术问题：

本发明黄芪中毛蕊异黄酮苷的提取与纯化方法，包括以下步骤：

(1)称取黄芪药材粉末，按每10公斤粉末加入100L的体积浓度为70-85％乙醇提取，过滤，滤液浓缩至无醇味，过大孔树脂，先用蒸馏水水洗至澄清，再用体积浓度为70-85％的乙醇洗脱，收集含毛蕊异黄酮苷的组份，回收乙醇，在水浴锅上浓缩得浸膏；

(2)称取浸膏，用适量甲醇溶解后加入100-200目的硅胶拌样进行硅胶柱层析，采用体积比为9∶1∶0.05的氯仿-甲醇-水溶液洗脱，收集样品，点板，合并含有毛蕊异黄酮苷斑点的组分，再将其蒸干；

(3)用适量甲醇溶解后再加入100-200目的硅胶拌样进行硅胶柱层析，采用体积比为9∶1∶0.05的氯仿-甲醇-水溶液洗脱，收集样品，点板，合并含有毛蕊异黄酮苷斑点的组分，蒸干得毛蕊异黄酮苷化合物粗品；

(4)粗品用适量甲醇溶解后加入2倍甲醇体积的石油醚萃取，弃去石油醚层，甲醇层有白色沉淀析出，过滤，滤渣依次用石油醚、甲醇洗涤，得米白色沉淀；

(5)米白色沉淀再经100-200目的硅胶拌样进行硅胶柱层析，采用体积比为9∶1∶0.05的氯仿-甲醇-水溶液洗脱，收集样品，合并含有毛蕊异黄酮苷的组份，用甲醇重结晶，得到纯的毛蕊异黄酮苷，挥干，保存。

采用本发明方法可制取中药材对照品黄芪毛蕊异黄酮苷，而且效率高、成本低。

附图说明

图1是本发明方法的工艺流程图。

具体实施方式

以下通过具体实施例对本发明的技术方案作进一步说明。

实施例1称取黄芪药材粉末(过50目筛)10公斤，加入100L的体积乙醇提取，过滤，滤液浓缩至无醇味，过D-101大孔树脂(HG2-885-76)，再用体积浓度为70％的乙醇洗脱，收集含毛蕊异黄酮苷的组份浓缩，回收乙醇，在水浴锅上浓缩得浸膏。称取浸膏，用适量甲醇溶解后加入100-200目的硅胶拌样进行硅胶柱层析，采用体积比为9∶1∶0.05的氯仿-甲醇-水溶液进行洗脱，收集合并含有毛蕊异黄酮苷斑点的组分。再用适量甲醇溶解后加入100-200目的硅胶拌样进行硅胶柱层析，采用体积比为9∶1∶0.05的氯仿-甲醇-水溶液进行洗脱，得粗品毛蕊异黄酮苷。将粗品用适量甲醇溶解后加入石油醚(2倍甲醇体积量)萃取，弃去石油醚层，甲醇层有白色沉淀析出，过滤，滤渣依次用石油醚、甲醇洗涤，得米白色沉淀。此米白色沉淀再经100-200目的硅胶拌样进行硅胶柱层析，采用体积比为9∶1∶0.05的氯仿-甲醇-水溶液进行洗脱，收集，合并含有毛蕊异黄酮苷的组份，用甲醇重结晶，得到纯度为98.8％(HPLC面积-归一法测定)的毛蕊异黄酮，挥干，保存。