[发明专利]一种高通量、非破坏性种子组织的取样方法

权利要求书

1.一种高通量、非破坏性种子组织的取样方法，其特征在于高通量、非破坏性种子组织的取样方法按照以下步骤完成：

一、准备材料：植物种子、钻头、可调速台钻、孔板、移液管枪头、空气压缩机、铝箔纸；用双层铝箔纸将孔板上口处包裹严密，用胶带将铝箔纸边缘固定在样品板上，轻压铝箔纸，使孔板的样品孔轮廓凸现；

二、钻孔、收集胚乳组织：将可调速台钻放置于操作台上，安装上钻头，钻孔的位置选取植物种子上远离胚胎的一侧，使钻头不破坏种子胚胎，钻头转速为200～400r/min，最初钻取的表皮部分弃去，钻至胚乳组织时，使用移液管枪头收集，移液管枪头小头的一端用带有乳胶手套的手指按住，将钻取的胚乳组织从移液管枪头大头一端倒入移液管枪头中；

三、转移胚乳组织，将盛有胚乳组织的移液管枪头倾斜，使移液管枪头与水平面呈10～30度角，移液管枪头小头一侧位于低处，移开按住移液管枪头小头的手指，用移液管枪头的小头将铝箔纸刺破，将移液管枪头插入孔板的样品孔中，然后直立移液管枪头，使胚乳组织流入到孔板的样品孔中；

四、清洗，用空气压缩机吹出的高压空气将移液管枪头、钻头和乳胶手套上沾有的胚乳组织吹走；

五、重复步骤二至四，直至完成所有种子的取样。

2.根据权利要求1所述的一种高通量、非破坏性种子组织的取样方法，其特征在于步骤一中钻头大小根据种子大小来确定，以百粒种子的重量m为标准，当m≤6.0g时，选用直径为1.0～1.3mm的钻头；当6.0g＜m＜20.0g时，选用直径为1.5～2.0mm的钻头；当m≥20.0g时，选用2.1～5.0mm的钻头。

3.根据权利要求1所述的一种高通量、非破坏性种子组织的取样方法，其特征在于步骤一中孔板的规格为96孔、2mL/孔或384孔、200μL/孔。

4.根据权利要求1所述的一种高通量、非破坏性种子组织的取样方法，其特征在于步骤一中孔板的选择根据每个种子的取样量来确定，当取样量为30mg～100mg时，选用96孔、2mL/孔的孔板，当取样量为2mg～8mg时，选用384孔、200μL/孔的孔板。

5.根据权利要求1所述的一种高通量、非破坏性种子组织的取样方法，其特征在于步骤一中移液管枪头规格为5mL。

6.根据权利要求1所述的一种高通量、非破坏性种子组织的取样方法，其特征在于步骤二中钻头转速为250～350r/min。

7.根据权利要求1所述的一种高通量、非破坏性种子组织的取样方法，其特征在于步骤三中移液管枪头与水平面呈15～25度角。

8.根据权利要求1所述的一种高通量、非破坏性种子组织的取样方法，其特征在于步骤四中空气压缩机的排气量为95L/min。