[发明专利]一种环匹阿尼酸类化合物及其制备和应用

说明书

技术领域

本发明涉及医药和新型农药领域，具体为一种环匹阿尼酸类化合物及其制备和应用。 

背景技术

据联合国粮农组织(FAO)报告，植物病虫害等每年可造成全球粮食减产达31％-42％，直接威胁到粮食安全。目前，粮食的病虫害问题主要依赖化学合成农药进行控制；但是其中大部分农药存在药物作用对象的低选择性和高毒性，在杀死目标害虫的同时也对无害或有益的微生物、昆虫及植物等造成生长抑制；还会造成害虫的耐药性、环境污染以及食品安全等方面的问题。所以，寻找低毒、环境友好型的新型农药是一个迫待解决的问题。 

我国是个海洋大国，拥有丰富的海洋生物资源；我国也是一个农业大国，对于农药的使用具有很强的依赖性。本研究的实施将使海洋微生物资源更好地服务于农业的发展，并在研制新型低毒环保农药、减少毒性农药的使用量、保障食品安全以及实现农业的可持续性发展等方面具有重要的意义。 

环匹阿尼酸类似结构非常罕见，附图1中列出了目前发现的所有类似结构的天然产物。前人对α-cyclopiazonic acid的生合成进行了研究，已证明它是由L-色氨酸、醋酸、甲羟戊酸演变而来，并且它的前体化合物是β-cyclopiazonic acid。2009年发现的新化合物iso-α-cyclopiazonic acid推测是由D-色氨酸衍生而来。研究表明环匹阿尼酸是由一分子L-色氨酸，一分子甲羟戊酸，两分子乙酸合成的，并且β-环匹阿尼酸是环匹阿尼酸的前体化合物。 

发明内容

本发明的目的是提供一种环匹阿尼酸类化合物及其制备和应用。 

为实现上述目的，本发明采用技术方案为： 

一种环匹阿尼酸类化合物，所述环匹阿尼酸类化合物为3-羟基speradine A(3-hydroxyl speradine A)，如(I)所示： 

所述(I)所示结构式中的E环部分存在如图(II)所示的互变异构体，E环部分可表达为以下任一种结构单元； 

所述E环为图(II)中的(d)结构。 

环匹阿尼酸类化合物的制备方法： 

1)将米曲霉(Aspergillus oryzae)接种于液体培养基中摇瓶发酵6-10天；过滤，滤液用大孔吸附树脂吸附，树脂与滤液质量体积比为之比为1∶10-30；吸附完成后，先用蒸馏水洗涤树脂，再用MeOH解吸，回收甲醇溶剂后得环匹阿尼酸粗提物； 

2)步骤1)中所得粗环匹阿尼酸用进行正相色谱分离；首先用乙酸乙酯洗脱除去非极性杂质，再用体积比为90∶10-80∶20的乙酸乙酯-甲醇(v/v)洗脱，收集洗脱组分，即得含目标化合物的色谱流分； 

3)上述所得色谱流分再采用反相中压色谱进行纯化，采用体积百分比为50％-70％的甲醇水溶液洗脱，收集洗脱组分，即得纯度约60％的目标化合物；再将纯度约60％的目标化合物进行反相HPLC进行纯化，洗脱剂为含三氟乙酸(TFA)的甲醇水溶液，收集洗脱组分，即得纯度不低于90％的目标化合物。 

将米曲霉(Aspergillus oryzae)接种于液体培养基中摇瓶发酵8天；脂与滤液之比为20g/L。 

所述步骤2)中正相色谱分离的硅胶填料的粒径为10-50μm。所述步骤2)中乙酸乙酯-甲醇的体积比例为85∶15。所述步骤(3)中反相中压色谱填料为粒径40-60μm的ODS，ODS柱洗脱甲醇水的比例为60％MeOH。所述步骤(3)中HPLC纯化中洗脱剂为含0.03％浓度的TFA的甲醇溶液，其中MeOH∶0.03％TFA体积为＝55-65∶45-35。所述MeOH∶0.03％TFA体积比＝60∶40。 

环匹阿尼酸类化合物的应用，所述化合物作为杀虫剂、植物生长调节 剂或制备抗肿瘤的药物。 

所述化合物作为防治鳞翅目害虫的杀虫剂。防治鳞翅目害虫为甜菜夜蛾、真螨目害虫或朱砂叶螨。 

所述米曲霉于2011年12月26日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号为：CCTCC M 2011484，分类学命名为：Aspergillus oryzae Hmp-F28。 

本发明的优点：本发明从源于海洋海绵共附生真菌得到新型3位存在羟基取代的环匹阿尼酸类化合物。本发明化合物具有很好的杀虫活性、细胞毒活性以及促进植物生长的作用。同时本发明所提供的制备方法简单、高效，所得产物纯度高。本发明所涉及的菌株来，对进一步开发利用海洋微生物资源具有一定的参考价值。