[发明专利]IL-6R基因SNP位点的用途

权利要求书

1.IL-6R基因SNP位点在制备诊断类风湿关节炎易感性的检测试剂盒中的用途。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于所述IL-6R基因SNP位点为rs4845617和rs2228145。

3.IL-6R基因SNP位点单倍型或IL-6R和IL-6基因SNP位点单倍型在制备诊断类风湿关节炎易感性的检测试剂盒中的用途。

4.如权利要求3所述的用途，其特征在于所述IL-6R基因SNP位点单倍型为IL-6R基因SNP位点rs4845617和rs2228145单倍型，G-A、A-A或G-C单倍型。

5.如权利要求3所述的用途，其特征在于所述IL-6R和IL-6基因SNP位点单倍型为IL-6和IL-6R两个基因的五个SNP位点IL-6-rs1800796/rs1800797/rs1800795/IL-6R-rs4845617/IL-6R-rs2228145单倍组合，为C-G-G-G-A、G-G-G-A-C、G-G-G-G-A、C-G-G-A-C、G-G-G-A-A或G-G-G-G-C单倍组合。

6.如权利要求1或3中所述检测试剂盒，包括基因组DNA抽提试剂、PCR反应体系试剂和HRM荧光染料试剂，所述PCR反应体系包括dNTP、MgCl₂、Taq DNA聚合酶、PCR反应缓冲液和引物，其特征在于所述引物为分别针对IL-6R基因SNP位点rs4845617和rs2228145的引物对，和/或分别针对IL-6基因SNP位点rs1800796、rs1800797和rs1800795的引物对。

7.如权利要求6所述的检测试剂盒，其特征在于所述针对IL-6R基因SNP位点rs4845617的引物对的核酸序列如SEQ ID No.1～2所示，针对IL-6R基因SNP位点rs2228145的引物对的核酸序列如SEQ ID No.3～4所示；针对IL-6基因SNP位点rs1800796的引物对的核酸序列如SEQ ID No.5～6所示；针对IL-6基因SNP位点rs1800797的引物对的核酸序列如SEQ ID No.7～8所示；针对IL-6基因SNP位点rs1800795的引物对的核酸序列如SEQ ID No.9～10所示。

8.如权利要求6所述的检测试剂盒，其特征在于所述Taq DNA聚合酶为realstart酶。

9.如权利要求6所述的检测试剂盒，其特征在于所述HRM荧光染料为EvaGreen、Syto9、Resolight和SupperGreen中之一。

10.一种类风湿性关节炎易感性的检测方法，包括下列步骤：

a)基因组DNA的抽提；

b)PCR检测：PCR反应体系包含10-30ng基因组DNA，1×PCR Buffer，0.25UTaq DNA聚合酶，0.2mM dNTP，0.3μM上下游引物，1×HRM荧光染料，Mg²⁺浓度根据HRM荧光染料的种类不同变化；PCR扩增条件为预变性95℃2min，变性94℃10sec，退火延伸60℃30sec，共30-40个循环；

c)HRM检测：条件为96℃30sec，50℃30sec，熔解曲线数据收集从83℃到90℃，温度上升率0.05℃/s；

d)基因分型：依据熔解曲线峰型的改变进行基因分型；

其中所述上下游引物为分别针对IL-6R基因SNP位点rs4845617和rs2228145的引物对，和/或分别针对IL-6基因SNP位点rs1800796、rs1800797和rs1800795的引物对。