[发明专利]一种可以同时检测六种治病微生物的悬浮芯片检测方法无效
| 申请号: | 201110396892.8 | 申请日: | 2011-12-05 |
| 公开(公告)号: | CN103131760A | 公开(公告)日: | 2013-06-05 |
| 发明(设计)人: | 高志贤;孙智勇;宁保安;彭媛;白家磊;孙思明;苏璞 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院卫生学环境医学研究所 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/14;C12Q1/04;C12R1/19;C12R1/42;C12R1/63;C12R1/445;C12R1/01 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 300050*** | 国省代码: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 可以 同时 检测 治病 微生物 悬浮 芯片 方法 | ||
1.一种可以同时检测六种治病微生物的悬浮芯片检测方法,其中包括针对六种致病菌特有基因分别设计的引物,下游引物末端使用生物素标记,根据PCR扩增区内核酸序列设计特异性捕获探针,探针末端氨基C12修饰;所设计探针分别与Luminex编码微球偶联,偶联探针后的微球在一定条件下可以特异性地捕获生物素化的PCR产物,通过结合的链霉亲和素藻红蛋白,经Luminex检测仪,每个微球可同时被两束激光检测到,红色激光激发微球基质中的颜色,可根据微球的光谱地址而定性;而绿色激光则激发结合在待测样本上的链霉亲和素藻红蛋白进行定量。最后,通过软件,可以自动统计分析得出特定微球上的平均荧光强度。
2.权利1所述的检测方法,其中该方法包括步骤:1)单一、多重PCR的反应体系、反应条件;2)偶联探针的微球与目标物杂交温度的摸索;3)探针特异性验证方法;4)单一、多重检测的标准曲线绘制、检测范围及最低检出限的确定;5)方法检测灵敏度测定;6)方法特异性验证。
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