[发明专利]具有抗癌活性及双光子生物显影功能的类顺铂配合物及其制备方法

说明书

一、技术领域

本发明涉及一种具有抗癌活性的化合物及其制备方法，具体地说是一种具有高的抗癌活性，且具有双光子活体细胞显影功能的类顺铂配合物及其合成方法。

二、背景技术

由于双光子荧光具有激发能量低(近红外)、光损伤小、穿透性强等特点，使得双光子荧光显微成像技术得到广泛应用。在生物学中对于细胞、基因等微观物质的研究通常要借助显微镜来观察，但由于光线不够强或放大倍数有限等原因，有时仍不易清楚的观察，如癌细胞的裂变、DNA的复制等。如果具有双光子吸收特性的物质进入活细胞，在作用部位发荧光，显微镜下便能清楚的看到细胞内部的变化，且对细胞的光损伤小。

2008年Anthony W.Parker小组报道了一种具有双光子激发荧光且光稳定性好的二价铂配合物(Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，2008，105，16071-16076)，通过引入与生物分子相结合的不同功能基团，调节其在可见区的蓝绿光到橙光之间的发光波段。由于双光子吸收特性，一方面有效减少了对生物体的损害，另一方面在近红外区的光对生物体有良好的穿透性和高度的空间选择性。因此该化合物在双光子细胞显影方面有很好的应用价值。同年，麻省理工大学Stephen J.Lippard课题组报道了一种用于运输抗癌药物的化合物(J.Am.Chem.Soc.2008，130，11467-11476)，化合物含有抗癌作用的顺铂部分和将化合物带到细胞表面的叶酸衍生物长链部分。Pt的另一端通过酰胺键连接到单层碳纳米管上，作为一个运输通道，使化合物通过内吞作用进入到癌细胞内部，释放具有抗癌作用的顺铂部分。释放出顺铂后的有机基团在细胞内部，可以发出荧光，因此，该化合物既具有抗癌活性同时具有生物细胞显影作用。但是显影基团不具有双光子吸收特性，对生物细胞损伤较大，而且合成较为复杂，使其应用受到限制。

申请人对既具有抗癌活性、又具有双光子生物细胞显影功能的配合物进行了国内外范围内的检索，结果见下表：

1、www.google.com网检索结果：(2011/10/13)

2、中国期刊网检索结果：

检索方式一：

篇名-具有抗癌活性的类顺铂配合物双光子吸收材料：无相关文献。

篇名-具有抗癌活性及双光子生物显影功能的类顺铂配合物及其制备方法无相关文献。检索方式二：

全文-具有抗癌活性的类顺铂配合物双光子吸收材料：无相关文献。

全文-具有抗癌活性及双光子生物显影功能的类顺铂配合物及其制备方法无相关文献。

由此可见，既具有抗癌活性、又具有双光子生物细胞显影功能的配合物尚未见报道。

三、发明内容

本发明提供的类顺铂配合物，旨在既具有抗癌活性、又能在分子水平上直观地研究抗癌机理。所要解决的技术问题是赋于该配合物兼具抗癌活性和双光子细胞生物显影特性。

本发明类顺铂配合物的结构式为：

本配合物的制备方法以对硝基苯胺为起始原料，包括配体和类顺铂配合物合成的化学过程以及萃取、分离、浓缩和提纯等各物理过程，其特征是所述的化学过程有以下六个步骤：

1、4-硝基-(4′-乙氧基苯)苯胺(中间体M1)的合成

对硝基苯胺与对碘苯乙醚于二甲基亚砜(DMSO)溶剂中在碳酸钾、L-脯氨酸和碘化亚铜存在条件下及氮气保护下于85-115℃搅拌反应8-10小时，冷却后用乙酸乙酯萃取，萃取液经浓缩、硅胶层析柱提纯和脱溶(即真空蒸出溶剂，下同)后得到橙色结晶中间体M1。以对硝基苯胺的质量计，与碳酸钾的质量为1∶1.1-1.5，与L-脯氨酸的质量比为1∶0.1-0.2，与碘化亚铜的质量比为1∶0.05-0.1。

2、4-((4′-乙氧基苯基)(4″-硝基苯基)氨基)苯甲醛(中间体M2)的合成

中间体M1与对氟苯甲醛于DMSO溶剂中在碳酸钾和相转移催化剂存在条件下于85-95℃搅拌反应70-75小时，冷却后用乙酸乙酯萃取，萃取液经浓缩、硅胶层析柱提纯和脱溶后得到亮黄色固体中间体M2，以M1的质量计，与碳酸钾的质量比为1∶0.5-0.9，与相转移催化剂的质量比为1∶0.05-0.09。

3、4-(4′-(二乙基氨基)-(E)-苯乙烯基)-N-(4″-乙氧基苯基)-N′-(4″′-硝基苯基)苯胺(中间体M3)的合成