[发明专利]枯草芽孢杆菌木糖诱导的外分泌表达载体

权利要求书

1.一种枯草芽孢杆菌木糖诱导的外分泌表达载体pXYL-amyQ，其是以枯草芽孢杆菌质粒pHT43为出发质粒，去掉原有的启动子及其阻遏基因，插入枯草芽孢杆菌木糖启动子的表达盒和信号肽序列构建而成。

2.根据权利要求1所述的外分泌表达载体pXYL-amyQ，其特征在于：所述信号肽为α-淀粉酶基因信号肽，所述枯草芽孢杆菌木糖启动子的表达盒为木糖诱导的启动子及其阻遏蛋白。

3.根据权利要求2所述的外分泌表达载体pXYL-amyQ，其特征在于，所述α-淀粉酶基因信号肽是如下（a）或（b）的蛋白质：

（a）由序列表中SEQ ID NO.1所示的氨基酸组成的蛋白质；

（b）将SEQ ID NO.1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加且与SEQ ID NO.1具有相同功能的由SEQ ID NO.1衍生的蛋白质；

所述阻遏蛋白具体为如下（c）或（d）的蛋白质：

(c) 由序列表中SEQ ID NO.2所示的氨基酸组成的蛋白质；

（d）将SEQ ID NO.2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加且与SEQ ID NO.2具有相同功能的由SEQ ID NO.2衍生的蛋白质。

4.根据权利要求2所述的外分泌表达载体pXYL-amyQ，其特征在于，所述α-淀粉酶基因信号肽为如下1）、2）或3）的DNA分子：

   1）其碱基序列是SEQ ID NO.3所示的DNA分子；

   2）在严格条件下与1）限定的DNA序列杂交且编码所述蛋白的DNA分子；

3）与1）或2）限定的DNA序列具有90%以上的同源性，且具有相同功能的DNA分子；

所述阻遏蛋白的编码序列为如下4）、5）或6）的DNA分子：

    4) 其碱基序列是SEQ ID NO.4所述的DNA分子；

    5）在严格条件下与4）限定的DNA序列杂交且编码所述蛋白的DNA分子

6）与4）或5）限定的DNA序列具有90%以上的同源性，且具有相同蛋白功能的DNA分子。

5.根据权利要求2所述的外分泌表达载体pXYL-amyQ，其特征在于，所述木糖诱导的启动子为如下1）或2）的DNA分子：

    1）其序列是序列表中SEQ ID NO.5所示的DNA分子；

8）与1）限定的DNA序列具有90%以上同源性，且具有相同木糖诱导功能的DNA分子。

6.根据权利要求1所述的外分泌表达载体pXYL-amyQ，其特征在于，该表达载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。

7.如权利要求1-6中任一所述外分泌表达载体pXYL-amyQ在表达同源或外源蛋白中的应用。