[发明专利]松乳菇菌丝体固体发酵方法及其固体发酵提取物的应用

说明书

技术领域

本发明涉及固体发酵技术领域，具体涉及一种野生真菌菌丝体的固体发酵及其固体发酵提取物在动物和人保健上的应用，特别是松乳菇菌丝体固体培养及其培养物提取制备多糖多肽添加剂在动物与人保健上的应用。

背景技术

据报道，许多药用与食(药)用真菌的多糖具有提高免疫力、抗氧化、抗菌、抗病毒和抗肿瘤的功能，是当今开发动物和人保健品的重要方向，现有灵芝多糖、香菇多糖等一批产品上市。其原料来源，一是野外采取或人工栽培的子实体，二是人工发酵的菌丝体。液体深层发酵是生产真菌菌丝体的重要方法，但设备要求高，投资大，生产成本高，作为动物保健品一饲料添加剂开发成本太高，难以推广。固体发酵是我国特有的一种微生物发酵工艺，食(药)用真菌固体发酵始于20世纪60年代，应用科技的手段在人工严格控制条件下，研究以富含碳、氮及矿物质等各种营养成分的农副产品作为发酵基质，用特定的纯种食(药)用真菌作为发酵菌种，双方构成发酵组合，在特定的条件下进行发酵。在固体培养中，菌丝细胞能在培养室内处于最适的温度、氧气、二氧化碳等环境中生长，因此菌丝生长快速，能在短时间内产生大量的菌丝体。

松乳菇又名美味松乳菇、雁鹅菌、松杉菌、松菌、茶花菌、寒菌；系红乳菇科(Russnlaceae)，乳菇属(Lactarius)真菌；其肉质细嫩，味道鲜美独特，营养丰富，是稀有的食用菌，在湖南等地被视为山中珍品，市场上十分走俏；同时松乳菇也可药用，研究报道从松乳菇子实体、菌丝体或发酵液中提取出来的胞内或胞外多糖，具有抑制肿瘤、抗菌、提高机体免疫力等多种生理活性。松乳菇与松口磨、美味牛肝菌等菌一样，都属于菌根菌，与松、杉、柏等树种形成菌根菌。这类菌与植物共生，有特殊的生态条件、营养方式和子实体分化发育条件，对它驯化培养有很大的难度。因此，目前尚不能人工栽培，市场供应全依赖于野生采集。目前国内对松乳菇的培养研究主要采用菌丝体液体深层发酵法，以制备菌丝多糖。多数研究表明，松乳菇菌丝体液体发酵，在以葡萄糖、蔗糖、糊精、甘露醇等为碳源，以玉米浆、牛肉膏、硝酸铵等为氮源的培养基上生长良好，矿物质七水硫酸镁、氯化钠能使菌丝体启动加快，磷酸氢二甲使菌丝体产量提高，VB1、VB6、烟酸对菌丝体生长有促进作用，适宜培养温度为：25-27℃，pH值6-7.5。液体深层发酵具有发酵周期短、产量大等优点，是一种大量获取松乳菇多糖的有效途径；但存在着设备投资大，耗能高等问题。根据相关的研究，菌丝体固体发酵可以克服以上问题，但对松乳菇菌丝体的固体发酵研究鲜为报道；另外，关于真菌活性成分的研究多限于多糖，而多肽研究未见报道。因此，研究松乳菇菌丝体的固体发酵及其活性成分对该菌产品的开发均具有重要的意义。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的提供了一种松乳菇菌丝体的固体发酵方法，以及通过该固体发酵方法得到的产物粉碎和提取物的应用。该固体发酵方法所用的培养基是本发明筛选出来的一种用于松乳菇菌丝体的固体发酵培养基，使得多糖多肽含量均显著提高，另外可以在该培养基中添加植物类中草药，提高提取物中多糖多肽的含量，使得其在可以应用于食品或者饲料添加剂中，增加人畜免疫力。

本发明的技术方案之一是：

一种用于松乳菇菌丝体固体培养的培养基，包括碳源、氮源、微量元素和水，水占培养基总质量的百分含量为40％-70％，微量元素占培养基总质量的百分含量为0.08％-0.1％，其余为碳源和氮源，其中氮元素与碳元素之比(N∶C)为1∶5-18；

其中，碳源选自麸皮、面粉、米糠、秸秆粉、大米粉、玉米粉和膨化玉米等中的一种或几种；氮源选自玉米酒渣蛋白、玉米皮、植物蛋白、豆粕、棉粕和菜粕等中的一种或几种；微量元素选自硫酸镁或磷酸氢二钾等。

本发明的一种用于松乳菇菌丝体固体培养的培养基的优先配方如下：

培养基中水占培养基总质量的百分含量为55％-65％；微量元素占培养基总质量的百分含量为0.09％，其余为碳源和氮源，其中氮元素与碳元素之比为1∶8-15；所述碳源为麸皮和膨化玉米，其中麸皮与膨化玉米的质量比例为4∶1；所述氮源为豆粕和玉米皮，其中豆粕和玉米皮的质量比例为1∶3。

本发明的一种用于松乳菇菌丝体固体培养的培养基还包括在培养基中添加植物类中草药提高和改善发酵产物，植物类中草药添加量为培养基总质量的5％-30％。

所述植物类中草药添加剂选自牛膝、淮山、大枣、甘草、首乌、百合、当归、麦冬、白术、党参、粉葛、黄精、枸杞、天花粉、玉竹、薏米、黄芪和绞股蓝等中的一种或几种。