[发明专利]可诱导和激活癌靶向T细胞的融合蛋白及制备方法及用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种融合蛋白及制备方法及用途，属于生物医药领域。 

背景技术

表皮生长因子(Epidermal growth factor，EGF)、血管内皮细胞生长因子(Vascularendothelial cell growth factor，VEGF)、促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasinghormone，GnRH)和促胃液素释放肽(gastrin-releasing peptide，GRP)等的受体在各种肿瘤组织中大量表达，例如在肠黏膜肿瘤中的EGF受体比正常组织高出300倍(Gastroenterology，98，961-967，1990)。所以，异常高表达的EGF受体、VEGF受体、GnRH受体、GRP受体等成为引人注目的癌治疗靶点。转化生长因子-α(Transforming growth factor-α，TGF-α)的受体与EGF的受体相同。 

上面这些细胞因子以及激素和多肽等可以与癌细胞上的相对应的受体(Receptor)相互作用。所以在它们的后面连接一个效应物例如毒素蛋白而形成融合蛋白，就可以靶向性攻击癌细胞(J Biol Chem，267，24034-24040，1992；Proc Natl Acad Sci USA，99，7866-7871，2002；Cancer Res，54，5154-5159，1994；J Biol Chem，272，11597-11603，1997；Cancer Res，57，290-294，1997)。 

T细胞的有效活化需要两个信号的参与，即需要抗原肽-MHC复合物与T细胞上的TCR-CD3结合提供第1信号，以及共刺激分子(Costimulatory molecules)B7介导的第2信号。最基本的共刺激信号由抗原递呈细胞表达的B7.1(CD80)、B7.2(CD86)分子与T细胞上表达的相应受体(CD28和CTLA-4)提供(Amj Respir Crit Care Med，162，5164-5168，2000；Immunol CellBiol，77，304-311，1999；Clin Cancer Res，13，5271-5279，2007；Trends Immunol，24，313-318，2003)。 

B7.1表达在活化的DC、B细胞和单核细胞上，B7.2在B细胞、T细胞、DC和巨噬细胞上呈低水平表达，但B7.2可被诱导快速上调，而B7.1被诱导上调表达时间比B7.2晚。初始T细胞上的CD28与APC上的B7.1/B7.2结合，可以促进IL-2转录，同时使IL-2受体在T细胞上表达增加，从而促进T细胞增殖，还可以通过增加Bcl-xl的表达途径使T细胞免于凋亡。 

作为药物的应用，B7.1-Fc和B7.2-Fc可以诱导和激活抗癌的T细胞，显示出抗肿瘤的生物活性(Cancer Res，59，4964-4972，1999；Clin Cancer Res，11，8492-8502，2005；JImmunol，172，1347-1354，2004；Cancer Res，62，5727-5735，2002)。 

在抗癌的靶向性药物中，抗体是很流行的手段，但是抗体只是封闭癌细胞，与T淋巴细胞无关。肿瘤组织富含大血管和毛细血管，这些血管不仅给肿瘤输送营养，而且血管中有大量的淋巴细胞，其中70-80％是T淋巴细胞，但是这些T细胞是没有癌细胞特异性，是不会攻击肿瘤的。利用这些没有癌细胞特异性的T细胞来靶向性攻击癌细胞，是一种抗癌领域中的 新的强有力的手段，这样的药物是不同于抗体的，现在没有报道。 

发明内容

本发明的目的是克服现有技术中的不足，提供一种可诱导和激活癌靶向T细胞的融合蛋白。 

本发明的第二个目的是提供一种含有可诱导和激活癌靶向T细胞的编码融合蛋白的核苷酸序列的重组载体。 

本发明的第三个目的是提供一种可诱导和激活癌靶向T细胞的融合蛋白的制备方法。 

本发明的第四个目的是提供一种可诱导和激活癌靶向T细胞的用途。 

本发明的技术方案概述如下：