[发明专利]凡纳滨对虾磺乙基酵母多糖免疫增强剂

说明书

技术领域

本发明属于水产饲料免疫增强剂技术领域，具体涉及一种凡纳滨对虾的免疫增强剂，即可以提高凡纳滨对虾免疫力和抗病力的磺乙基酵母多糖。

背景技术

由于种质的退化和片面追求产量造成的养殖环境恶化，养殖对虾疾病在世界范围内频繁爆发，并造成巨大的经济损失。抗生素曾经被用于治疗对虾疾病，但是抗生素具有一系列副作用，主要表现在对虾体内药物残留以及致病菌耐药性的升高。免疫增强剂是指具有促进或诱发宿主防御反应，增强生物机体抗病能力的一类物质，具有安全、无残留、作用范围广和使用方便等优点。但是，在实际生产中发现，免疫增强剂在凡纳滨对虾养殖生产中效果不佳，主要表现在当疾病爆发时，使用免疫增强剂往往没有预期效果。酵母多糖是水产养殖中常用的免疫增强剂，但也存在对养殖对虾免疫力和抗病力提高不显著等缺点。因此，急需一种对凡纳滨对虾具有显著免疫效果的免疫增强剂。

发明内容

本发明的目的是提供一种提高凡纳滨对虾免疫力和抗病力的磺乙基酵母多糖，从而弥补现有技术的不足。

本发明的凡纳滨对虾的免疫增强剂，为磺乙基酵母多糖。

上述的磺乙基酵母多糖的磺乙基取代度为0.550～0.728。

本发明免疫增强剂的制备方法，是在碱性的反应体系下，添加2-氯乙基磺酸钠与酵母多糖反应制备磺乙基酵母多糖。

上述制备方法中添加的2-氯乙基磺酸钠与酵母多糖的质量比为7～9∶5。

本发明的免疫增强剂，添加在凡纳滨对虾饲料中，与饲料的质量比为1∶500～1000。

上述的饲料配方优选为：鱼粉20～30％，虾壳粉4～6％，面粉25～30％，鱿鱼内脏粉4～6％，豆粕15～20％，花生粕12～17％，鱼油0.5～1.5％，大豆软磷脂1～3％，对虾用维生素矿物质预混料1.5～4％。

本发明的免疫增强剂在对虾饲料中使用，添加量仅为0.1％～0.2％，就能明显促进凡纳滨对虾的生长，显著提高凡纳滨对虾的免疫力和抗病力。其应用效果显著好于酵母多糖。同时，本发明的免疫增强剂配合申请人制备的凡纳滨对虾饲料来使用时，能够获得更好的效果。

说明书附图

图1：本发明的磺乙基酵母多糖的结构式。

具体实施方式

下面对本发明的免疫增强剂磺乙基酵母多糖进行详细描述。

实施例1：不同取代度的磺乙基酵母多糖的制作：

取62.5ml异丙醇，加入5g酵母葡聚糖，在10℃不断搅拌，在搅拌过程中，逐滴加入7.25ml30％氢氧化钠溶液。继续在10℃搅拌，反应1小时。1小时后，加入2-氯乙基磺酸钠，其中添加的2-氯乙基磺酸钠与酵母多糖的质量比为7～9∶5；然后将整个反应体系置于70℃下，反应3小时。在反应过程中，不断搅拌，使反应充分进行。反应结束后，用10％的乙酸(溶解于80％的乙醇中)将pH调至7.0。后将反应体系用去离子水透析72小时，得到无氯离子的含有磺乙基酵母葡聚糖的溶液。将此溶液真空干燥，即得到磺乙基酵母葡聚糖。

实施例2：磺乙基酵母多糖取代度的测定

1.试剂的配置

0.6mg/ml硫酸基标准贮备液的配制：取烘干的硫酸钾108.75mg，以1mol/L的盐酸溶解，定容至100ml。

明胶溶液：取5g明胶，溶解于70℃去离子水中，搅拌，使其充分溶解。

明胶氯化钡溶液：取0.5g氯化钡，溶解于明胶溶液中，定容至100ml。

2.样品的水解

取一只10ml带盖玻璃试管，加入100mg磺乙基葡聚糖和10ml 6mol/L的盐酸溶液。将试管封闭，置于沸水浴中4小时。待冷却后，将试管内液体过滤，以6mol/L的盐酸清洗滤渣，将滤液收集定容至50ml。

3.样品的测定

取上述定容液0.2ml，加入3.8ml 3％三氯乙酸溶液，1.0ml明胶氯化钡溶液，反应15分钟后，于360nm波长下测吸光值A1。另取上述定容液0.2ml，加入3.8ml3％三氯乙酸溶液，1.0ml明胶溶液，反应15分钟后，于360nm波长下测吸光值A2。

取硫酸基标准贮备液0.2ml，加入3.8ml3％三氯乙酸溶液，1.0ml明胶氯化钡溶液，反应15分钟后，于360nm波长下测吸光值A1’。另取硫酸基标准贮备液0.2ml，加入3.8ml 3％三氯乙酸溶液，1.0ml明胶溶液，反应15分钟后，于360nm波长下测吸光值A2’。

4.取代度的计算