[发明专利]一种培育抗病小麦的方法及其专用重组质粒

权利要求书

1.一种融合蛋白，包括TiERF1蛋白和RC7蛋白；

所述TiERF1蛋白是如下(a)或(b)：

(a)由序列表中序列3所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)将序列3的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物抗病性相关的由序列1衍生的蛋白质；

所述RC7蛋白是如下(c)或(d)：

(c)由序列表中序列4所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(d)将序列4的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物抗病性相关的由序列1衍生的蛋白质。

2.权利要求1所述融合蛋白的编码基因。

3.如权利要求2所述的基因，其特征在于：所述融合蛋白的编码基因包括TiERF1蛋白的编码基因和RC7蛋白的编码基因；

所述TiERF1蛋白的编码基因是如下1)至3)中任一所述的DNA分子：

1)序列表中序列2所示的DNA分子；

2)在严格条件下与1)限定的DNA序列杂交且编码植物抗病相关蛋白的DNA分子；

3)与1)限定的DNA序列具有90％以上同源性且编码植物抗病相关蛋白的DNA分子；

所述RC7蛋白的编码基因是如下4)至6)中任一所述的DNA分子：

4)序列表中序列5所示的DNA分子；

5)在严格条件下与4)限定的DNA序列杂交且编码植物抗病相关蛋白的DNA分子；

6)与4)限定的DNA序列具有90％以上同源性且编码植物抗病相关蛋白的DNA分子。

4.如权利要求3所述的基因，其特征在于：所述融合蛋白的编码基因依次包括RSS1P启动子、所述TiERF1蛋白的编码基因和所述RC7蛋白的编码基因；所述RSS1P启动子如序列表的序列1所示；所述RSS1P启动子启动所述TiERF1蛋白的编码基因的表达。

5.含有权利要求2或3或4所述融合蛋白的编码基因的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。

6.如权利要求5所述的重组表达载体，其特征在于：所述重组表达载体按照如下方法制备：用限制性内切酶HindIII酶切重组质粒pA25-RC7，回收小片段并插入重组质粒pA20-TiERF1的多克隆位点，得到的重组质粒；

所述重组质粒pA20-TiERF1按照如下方法制备：将pAHC20质粒Sph I和BamH I酶切位点之间的小片段替换为序列表的序列1所示的RSS1P启动子、BamH I和Sac I酶切位点之间的小片段替换为序列表的序列2所示的TiERF1基因，得到重组质粒；

所述重组质粒pA25-RC7按照如下方法制备：将pAHC25质粒SmaI和SacI酶切位点之间的小片段替换为序列表的序列5所示的RC7基因，得到重组质粒。

7.一种培育抗病植物的方法，是将权利要求2或3或4所述融合蛋白的编码基因导入目的植物中，得到抗病性高于所述目的植物的转基因植物。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于：所述融合蛋白的编码基因通过权利要求5或6所述重组表达载体导入所述目的植物中。

9.如权利要求7或8所述的方法，其特征在于：所述目的植物为单子叶植物或双子叶植物，所述单子叶植物优选为小麦；所述抗病为抗纹枯病和/或抗全蚀病。

10.权利要求1所述蛋白，或权利要求2或3或4所述基因，或权利要求5或6所述重组表达载体在培育抗病植物中的应用。