[发明专利]人残耳软骨干细胞及其构建组织工程软骨的方法

权利要求书

1.一种组织工程化软骨移植物，其特征在于，它含有在三维结构下生长的人残耳软骨细胞；所述的人残耳软骨细胞是第1、2、3、4、5、6、7、或8代传代的；优选第1、2、3、4、或5代的。

2.如权利要求1所述的软骨移植物，其特征在于，所述三维结构是由所述的人残耳软骨细胞聚集形成的团块、或高密度所述人残耳软骨细胞接种于培养皿所形成的细胞膜片、或是由所述人残耳软骨细胞接种于固体的医学上可接受的生物可降解材料形成。

3.如权利要求1所述的软骨移植物，其特征在于，所述的人残耳软骨细胞来自自体或同种异体；优选小耳畸形患者自体的残耳软骨。

4.如权利要求1-3任一所述的软骨移植物，其特征在于，以所述移植物的总体积计，其中的人残耳软骨细胞浓度为2×10⁷个细胞/cm³-10×10⁷个细胞/cm³；优选2×10⁷个细胞/cm³-7×10⁷个细胞/cm³。

5.如权利要求4所述的软骨移植物，其特征在于，所述移植物的形状同人体需要移植软骨的缺损部位形状相符。

6.一种如权利要求1-5任一所述的软骨移植物的制备方法，所述的方法包括步骤：

(1)将人残耳软骨细胞进行平面扩增，并传代至第1、2、3、4、5、6、7、或8代；

(2)将第1、2、3、4、5、6、7、或8代传代的人残耳软骨细胞通过离心形成团块、或将第1、2、3、4、5、6、7、或8代传代的人残耳软骨细胞高密度接种形成细胞膜片、或将第1、2、3、4、5、6、7、或8代传代的人残耳软骨细胞与固体的医学上可接受的生物可降解材料混合形成细胞-生物材料复合物；

(3)将团块、细胞膜片或复合物进行体外软骨诱导；以总体积计，所述体外软骨诱导液中含有5-50ng/ml TGF-β₁(Transforming Growth Factor-β₁，转化生长因子-β₁)和10-100ng/ml的地塞米松(dexamethasone)。

7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，体外成软骨诱导的时间为3-20周；优选6-12周。

8.一种如权利要求1-5任一所述的软骨移植物在构建组织工程化耳廓移植物中的应用。

9.一种人残耳软骨细胞在体外构建组织工程化软骨中的应用。

10.一种人残耳软骨细胞在体外构建组织工程化耳廓移植物中的应用。