[发明专利]皂苷化合物及其制备方法与在制备免疫佐剂中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及药物化学，具体涉及从中药金铁锁中提出分离得到的皂苷化合物及其制备方法与在免疫佐剂中的应用。

背景技术

随着分子生物学的发展，第二代疫苗多以纯化重组蛋白、合成肽抗原和质粒DNA抗原为主，以替代第一代疫苗活的弱病毒抗原产生的安全隐患。然而纯化抗原通常免疫原性较弱，为了克服这一弱点，抗原需要与适当的佐剂相混合。但是，需要该佐剂有较长的稳定期，不易产生降解并易于生产。另外，最重要的是佐剂可以激发机体强烈的细胞免疫应答与抗体生成能力，使机体产生较强的免疫保护能力。由于不同的佐剂需要和不同的抗原进行作用，因而疫苗在研究中对各种类型的感染，就需要有选择性地促进机体诱导适宜的免疫应答。目前，用于人用疫苗的佐剂为铝盐佐剂(主要是氢氧化铝及其磷酸盐，Alum)。1926年至今，铝盐佐剂已成为人用疫苗中经常使用的佐剂。但铝盐佐剂存在一些问题，主要有：(1)因其理化性质特点，铝盐疫苗冷冻后胶体状态被破坏，因此不能冷冻干燥和在低温状态下运输。(2)因含盐量高，贮存日久有结晶沉淀，而分批制备相同的疫苗也显得比较困难。(3)虽然，铝是否与老年性痴呆诱发相关尚无定论，但对人、畜的神经系统可能有影响。(4)在注射部位有时会发生局部无菌性脓肿，甚至可以形成肉芽肿，轻度局部反应较为常见。(5)以铝盐佐剂作疫苗较少，它主要适用于以抗体为保护性免疫的疫苗。(6)由于主要激活2型T辅助(Th2)细胞和诱导体液免疫应答，佐剂活性低，因此，一般在如白喉、破伤风、乙肝、麻疹等疫苗中使用。(7)铝盐佐剂释放抗原物质的速度缓慢，效应也比较弱，对许多抗原都不够有效，对抗原的要求比较高。

皂苷经研究发现其可以激活哺乳动物的免疫系统，故它们的免疫佐剂活性受到了广泛关注。皂苷QS-21是最具代表性的物质，其研究已进入临床试验阶段。皂苷QS-21是南美皂树树皮提取物皂树皮皂苷(Quil A)的主要成分，研究表明其产生抗体应答持续保护时间要比铝盐佐剂长，因此可以作为铝盐佐剂替代物。但是，Quil A存在严重的毒性，对小鼠的致死量在100-125μg，除此还有严重的溶血性，在注射部位可引起肉芽肿和注射部位症状，所以限制了在人用疫苗中的使用。至今，从Quil A中分离得到23种单体化合物。皂苷QS-21对小鼠的致死剂量是500μg，毒性虽小于Quil A，但是它还是仅用于肿瘤疫苗中。而且，皂苷QS-21等分子结构中存在酯键结构影响了其稳定性。因而，人们越来越关注从其它植物中寻找具免疫佐剂活性且毒性相对较低的皂苷。

皂苷QS-21的化学结构式

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发明内容

本发明所要解决的技术问题在于克服上述不足之处，研究设计具免疫佐剂活性且毒性较低的皂苷化合物。

本发明提供一种皂苷化合物，包括金铁锁皂苷B和金铁锁皂苷C，如下列结构式：

金铁锁皂苷B

金铁锁皂苷C

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本发明的另一目的是提供了上述皂苷化合物的制备方法。

本发明的皂苷化合物是从中药金铁锁中提取分离得到的金铁锁皂苷A单体(Cp1)，再经过结构修饰得到金铁锁皂苷B和金铁锁皂苷C。

本发明提供的制备方法包括以下步骤：