[发明专利]微卫星杂合性缺失位点在鉴别肝癌克隆起源中的应用

权利要求书

1.微卫星杂合性缺失位点组合在制备判断复发性肝细胞癌组织的克隆起源的诊断试剂盒中的应用，其特征在于，所述的微卫星杂合性缺失位点组合由至少6个微卫星位点组成，所述的微卫星位点选自以下12个微卫星位点：D16S514，D16S505，D1S243，D8S258，D17S831，D8S520，D4S402，D17S938，D16S419，D1S507，D8S277，D8S264。

2.微卫星杂合性缺失位点组合在制备判断多结节性肝细胞癌组织的克隆起源的诊断试剂盒中的应用，其特征在于，所述的微卫星杂合性缺失位点组合由至少6个微卫星位点组成，所述的微卫星位点选自以下10个微卫星位点：D16S514，D8S264，D17S938，D8S520，D8S277，D1S507，D17S831，D16S505，D4S406，D16S419。

3.一种判断复发性肝细胞癌组织的克隆起源的诊断试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒含有至少6对特异性引物，所述的特异性引物选自以下12对特异性引物：

（1）D16S514位点：SEQ ID NO.21和SEQ ID NO.22；

（2）D16S505位点：SEQ ID NO.23和SEQ ID NO.24；

（3）D1S243位点：SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2；

（4）D8S258位点：SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12；

（5）D17S831位点：SEQ ID NO.25和SEQ ID NO.26；

（6）D8S520位点：SEQ ID NO.17和SEQ ID NO.18；

（7）D4S402位点：SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6；

（8）D17S938位点：SEQ ID NO.29和SEQ ID NO.30；

（9）D16S419位点：SEQ ID NO.27和SEQ ID NO.28；

（10）D1S507位点：SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4；

（11）D8S277位点：SEQ ID NO.15和SEQ ID NO.16；

（12）D8S264位点：SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.14。

4.一种判断多结节性肝细胞癌组织的克隆起源的诊断试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒含有至少6对特异性引物，所述的特异性引物选自以下10对特异性引物：

（1）D16S514位点：SEQ ID NO.21和SEQ ID NO.22；

（2）D8S264位点：SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.14；

（3）D17S938位点：SEQ ID NO.29和SEQ ID NO.30；

（4）D8S520位点：SEQ ID NO.17和SEQ ID NO.18；

（5）D8S277位点：SEQ ID NO.15和SEQ ID NO.16；

（6）D1S507位点：SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4；

（7）D17S831位点：SEQ ID NO.25和SEQ ID NO.26；

（8）D16S505位点：SEQ ID NO.23和SEQ ID NO.24；

（9）D4S406位点：SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10；

（10）D16S419位点：SEQ ID NO.27和SEQ ID NO.28。

5.根据权利要求3或4任一所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒操作方法包含以下步骤：（1）提取病人石蜡组织DNA；（2）使用所述的试剂盒中的引物降落PCR扩增引物所对应的微卫星位点片段；（3）PCR产物进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳；（4）电泳结果进行硝酸银染色；（5）染色后在全自动紫外分光系统下拍照并分析结果。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒判断标准是，当被检测肿瘤的杂合性缺失率达到30%或以上时，可以判断肿瘤起源为多克隆起源，达不到上述标准则判断为单克隆起源。