[发明专利]高碘酸钠氧化法固定磷脂酶A1用于大豆毛油脱胶的方法

权利要求书

1.一种高碘酸钠氧化法固定磷脂酶A₁用于大豆毛油脱胶的方法，其特征在于通过以下步骤实现：

一、磷脂酶A₁的固定化：取一张含有羟基的膜悬浮于0.01～0.3mol/L的高碘酸钠溶液中，室温下置于摇床中活化30～100min，取出立即用去离子水洗至中性，吸干水分；然后将含有羟基的膜置于平皿中，在5～35℃条件下，分别与0.01～0.09g/mL的酶液和pH为5.8的磷酸盐缓冲液，加入体积浓度0.05～0.6％戊二醛进行交联反应1～6h，交联反应结束后将所述含有羟基的膜悬浮于体积浓度为1％的氢硼化钠溶液中，4℃反应20～40min，然后用HAI溶液、KCl溶液和水分别洗涤三次，晾干剪碎即得固定化磷脂酶A₁；

二、大豆毛油脱胶：先经水化脱胶法去除大豆油中的水化磷脂，然后向经过处理的大豆油中加入质量浓度为40％～45％的柠檬酸溶液并以1000～1500r/min的速度搅拌5～20min，再向经过处理的大豆油中添加质量浓度为4％的NaOH溶液并不断进行搅拌直至大豆油的pH值在4.0～6.0之间时停止添加NaOH溶液；

三、在45～55℃条件下向调整好pH值的大豆油中加入其质量的0.1％～0.5％的固定化磷脂酶A₁；

四、对加入固定化磷脂酶A₁的大豆油以40～100r/min的速度搅拌2～10h，然后对加入固定化磷脂酶A₁的大豆油以3000～3500r/min的速度离心5～20min，去除杂质，即可。

2.根据权利要求1所述的高碘酸钠氧化法固定磷脂酶A₁用于大豆毛油脱胶的方法，其特征在于步骤二中向经过处理的大豆油中加入质量浓度为41％～44％的柠檬酸溶液并以1100～1400r/min的速度搅拌9～16min。

3.根据权利要求1所述的高碘酸钠氧化法固定磷脂酶A₁用于大豆毛油脱胶的方法，其特征在于步骤二中向经过处理的大豆油中加入质量浓度为42～43％的柠檬酸溶液并以1200～1300r/min的速度搅拌11～14min。

4.根据权利要求1所述的高碘酸钠氧化法固定磷脂酶A₁用于大豆毛油脱胶的方法，其特征在于步骤二中向经过处理的大豆油中加入质量浓度为42～43％的柠檬酸溶液并以1200～1300r/min的速度搅拌11～12min。

5.根据权利要求1所述的高碘酸钠氧化法固定磷脂酶A₁用于大豆毛油脱胶的方法，其特征在于步骤二中向经过处理的大豆油中添加质量浓度为4％的NaOH溶液并不断进行搅拌直至大豆油的pH值在4.5～5.5之间时停止添加NaOH溶液。

6.根据权利要求1所述的高碘酸钠氧化法固定磷脂酶A₁用于大豆毛油脱胶的方法，其特征在于步骤三中在48～54℃条件下向调整好pH值的大豆油中加入为调整好pH值的大豆油质量的0.1％～0.45％的固定化酶。

7.根据权利要求1所述的高碘酸钠氧化法固定磷脂酶A₁用于大豆毛油脱胶的方法，其特征在于步骤三中在50～52℃条件下向调整好pH值的大豆油中加入为调整好pH值的大豆油质量的0.2％～0.3％的固定化酶。

8.根据权利要求1所述的高碘酸钠氧化法固定磷脂酶A₁用于大豆毛油脱胶的方法，其特征在于步骤四中对加入固定化酶的大豆油以60～80r/min的速度搅拌5～9h。

9.根据权利要求1所述的高碘酸钠氧化法固定磷脂酶A₁用于大豆毛油脱胶的方法，其特征在于步骤四中对加入固定化酶的大豆油以3200～3300r/min的速度离心14～16min。