[发明专利]一种检测细胞凋亡信号通路的试剂及其PCR检测方法

权利要求书

1.一种检测细胞凋亡信号通路的试剂，其特征在于它包括以下引物：

（1）检测BAX基因的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-GGGTGGTTGGGTGAGACTC-3'；

5'-AGACACGTAAGGAAAACGCATTA-3'；

（2）检测ANGPTL4基因的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-GTCCACCGACCTCCCGTTA-3'；

5'-CCTCATGGTCTAGGTGCTTGT-3'；

（3）检测IL1A基因的的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-ATCATGTAAGCTATGGCCCACT-3'；

5'-CTTCCCGTTGGTTGCTACTAC-3'；

（4）检测MYBL2基因的的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-ATCGCCAAGATGTTGCCAGG-3'；

5'-GGACTCGCTCAAGAAGCCT-3'；

（5）检测PEA15基因的的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-CCTGACCTACTCACTATGGTGG-3'；

5'-GCTGCCGGATAATGTCTTTGTA-3'；

（6）检测PRKAA1基因的的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-GCGACAAGCCCACCTGATT-3'；

5'-TGTTTCAGCAACCAAGAATGGTA-3'；

（7）检测BIRC5基因的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-AGGACCACCGCATCTCTACAT-3'；

5'-AAGTCTGGCTCGTTCTCAGTG-3'；

（8）检测CASP1基因的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-TCCAATAATGGACAAGTCAAGCC-3'；

5'-GCTGTACCCCAGATTTTGTAGCA-3'；

（9）检测DAPK3基因的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-TCACTACCTGCACTCTAAGCG-3'；

5'-TTCCCCGCCTCGATCTTGT-3'；

（10）检测NUDT2基因的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-GCCTTGAGAGCATGTGGCTT-3'；

5'-ATGAATGCCATCTGATGCCTG-3'；

（11）检测内参GAPDH控制基因的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-TCATGGGTGTGAACCATGAGAA-3'；

5'-GGCATGGACTGTGGTCATGAG-3'。

2.一种用权利要求书1所述试剂检测细胞凋亡信号通路的PCR检测方法，其特征在于，所述PCR检测方法为实时荧光定量PCR方法。

3.根据权利要求书2所述的一种检测细胞凋亡信号通路的PCR检测方法，其特征在于，所述实时荧光定量PCR的反应体系为：Taq聚合酶反应混合液20μl，上游引物0.1-0.5μmol，下游引物0.1-0.5μmol，cDNA模板50-200ng，灭菌蒸馏水补足到40μl。

4.根据权利要求书3所述的一种检测细胞凋亡信号通路的PCR检测方法，其特征在于，所述Taq聚合酶为2×SYBR? Premix Ex Taq聚合酶。

5.根据权利要求书3所述的一种检测细胞凋亡信号通路的PCR检测方法，其特征在于，所述实时荧光定量PCR的反应程序为：95℃预变性，5分钟；98℃变性，10秒，55℃，20秒，72℃、15秒，进行40个循环。